[发明专利]新鲜烟叶中多种产物的联产方法

权利要求书

1.新鲜烟叶中多种产物的联产方法，包括下述步骤：

(1)原料预处理：将新鲜烟叶粉碎，然后经过固液分离获得固体烟叶和析出液；所述固液分离的方法是自然沉降法、真空抽滤法或板框压滤法；

(2)制备叶绿素铜钠盐：向将步骤(1)所得的固体烟叶中加入提取溶剂I进行提取，抽滤后得到提取液I和烟渣；提取液I加入碱性物质I皂化；皂化液去除有机溶剂后的水溶液，使用弱极性有机溶剂进行萃取，获得萃取液I和萃余液I；使用酸性物质调节萃余液I的pH，加入含铜离子的溶液，铜化制得叶绿素铜酸，加入碱性溶液II调pH，静置获得叶绿素铜钠盐结晶，洗涤、干燥得到叶绿素铜钠盐；

(3)制备蛋白质：采用等电沉淀法、絮凝剂沉淀法、乙醇沉淀法或硫酸铵沉淀法从步骤(1)所得的析出液中提取蛋白质；

(4)以步骤(2)的萃取液I制备烟碱、茄尼醇和香料，包括下述步骤：萃取液I经蒸馏、干燥后得到浸膏，浸膏超声条件下加入水，调pH，使用等体积有机溶剂萃取，得到萃取液II和萃余液II；萃取液II蒸馏、干燥后，溶于含水的乙醇中，以大孔树脂层析，并使用乙醇水溶液洗脱，流穿组份合并浓缩至干，得到香料浸膏精品；洗脱组分合并浓缩至干，溶于乙醇、甲醇、丙酮或乙腈，降温结晶，得到茄尼醇；将萃余液II调pH，加入等体积的有机溶剂萃取，得到萃取液III和萃余液III，将萃取液III蒸馏、干燥后即得到烟碱纯品；

(5)利用步骤(2)中的烟渣制备生物菌肥，是以所述烟渣为原料接种微生物菌种进行固态培养的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

所述步骤(1)中，固液分离的方法是真空抽滤法；

所述步骤(2)中提取溶剂I选自乙醇、丙酮、甲醇、正丙醇、异丙醇或其混合物的水溶液，浓度为60～100％，料液的质量体积比为1:2.5～15；提取次数为1～5次；提取时间为20～80min/次；提取方法选自冷浸提取法、超声振荡法或热回流法，热回流温度为50-70℃；所述的碱性物质I为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、碳酸钠，皂化pH为8～14；皂化温度为50-70℃；弱极性有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正己烷的至少一种，萃取次数为2-5次；所述的酸性物质选自硫酸、磷酸、盐酸中的至少一种，调节的pH为2～5；所述的含铜离子的溶液为硫酸铜、氯化铜溶液或二者的混合物，浓度为10～30％；所述碱性溶液II为NaOH水溶液，NaOH乙醇溶液，浓度为5～20％，调节的pH为10～14；结晶温度为0-10℃，时间为30min～2h；

所述步骤(3)中，采用等电沉淀法制备蛋白质，0～20℃条件下，调节析出液pH为3～7，沉淀时间0.5～4.0h；调节pH所用的物质选自磷酸、硫酸、盐酸中的至少一种；

所述步骤(4)中，有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正己烷、乙酸丁酯或煤油的至少一种；获得萃取液II时，pH调节为1-6；获得萃取液III时，pH调节为8-14；大孔树脂层析前，溶解样品的含水乙醇中乙醇浓度为70％-90％；大孔树脂是非极性或弱极性大孔树脂，选自XDA-1,801,806，XR919C，HPD600，AB-8或HZ802；大孔树脂后洗脱的含水乙醇中乙醇浓度为80％-100％,结晶温度为-20～10℃；所述步骤(5)中，所述的微生物菌种是枯草芽孢杆菌，接种量10％；发酵料层厚度为1～5cm，发酵温度8～15℃，发酵时间5～8天。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，提取溶剂I是浓度为90～100％的乙醇水溶液，料液的质量体积比为1:7～10，提取次数为2～5次，提取时间为30～60min/次，提取方法为50℃热回流法。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述的用于调节pH的物质为磷酸，于0～4℃条件下，使用磷酸调节pH为3～3.5，沉淀时间0.5～2.0h。