[发明专利]一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法

说明书

本发明公开了一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，包括以下步骤：(1)将黑曲霉活化后，摇瓶培养2‑3天，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；(2)、将白地霉活化后，摇瓶培养2‑3天，得到摇瓶种子液D；(3)、分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌活化后，摇瓶培养15‑20h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；(4)、配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液700‑750g/L、尿素5.0g/L、葡糖糖13‑15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；(5)、将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量5‑7％接入基础培养基发酵，得到黄腐酸的含量为25‑28％的发酵液。本发明的优点在于，不使用化学试剂，不破坏黄腐酸的活性。

技术领域

本发明属于农用黄腐酸制备技术领域，具体涉及一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法。

背景技术

黄腐酸是腐殖酸中分子尺寸最小、活性最大的组分，是腐殖酸有效成分中的精华，其极易被生物吸收。将黄腐酸添加到肥料中，其具有诸如降低水的硬度、增强植物的抗病能力、促进植物对肥料有效养分的吸收等诸多作用，因此其广泛用于生物药肥、制剂的制备。

目前国内外生产的黄腐酸大多为矿质黄腐酸，即从风化煤、褐煤、泥炭中提取，一般提取方法为碱溶酸析法、强酸抽提法、硫酸乙醇法、离子交换树脂法。虽然矿质黄腐酸提取原料价格低廉，但资源不可再生，且提取工艺相对复杂，需用使用大量化学试剂，造成环境污染，还易破坏黄腐酸的活性基团，降低生物活性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于：矿质黄腐酸提取工艺复杂，使用大量化学试剂，易污染环境，影响黄腐酸的生物活性。

本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：

一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，包括以下步骤：

(1)将黑曲霉在斜面培养基PDA上活化，然后在20-25℃下摇瓶培养2-3天，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；

(2)、将白地霉在斜面培养基PDA上活化，然后在25-27℃下摇瓶培养2-3天，得到摇瓶种子液D；

(3)、分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌在斜面培养基NBY上活化后，在32-35℃下摇瓶培养15-20h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；

(4)、配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液700-750g/L、尿素5.0g/L、葡糖糖13-15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；

(5)、将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量5-7％接入基础培养基发酵，得到黄腐酸的含量为25-28％的发酵液。

优选地，本发明所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述步骤(4)中的糖蜜发酵酒精废液的固形物含量为45％-70％。

优选地，本发明所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述糖蜜发酵酒精废液的存放时间为3-5个月。糖蜜发酵酒精废液存放期进行自然发酵，从而影响最终黄腐酸的含量。

优选地，本发明所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述糖蜜发酵酒精废液的存放时间为4个月。

优选地，本发明所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述步骤(1)和步骤(2)中所述的摇瓶培养的培养基中含有葡萄糖8-10g/L、麸皮浸提液25-27g/L。

优选地，本发明所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述步骤(3)中摇瓶培养的培养基中含葡糖糖32-35g/L、牛肉蛋白胨13-15g/L、酵母膏1.0-1.5g/L、氯化钠5-6g/L、磷酸二氢钾0.5-0.8g/L、PH7.0。