[发明专利]产脂肪酶且抑制灿烂弧菌的枯草芽孢杆菌及使用方法

说明书

本发明提供了一株枯草芽孢杆菌ZF003(Bacillus subtilis s)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15645，保藏日期为2018年4月26日。本发明还公开了所述的枯草芽孢杆菌的应用，将所述枯草芽孢杆菌应用于刺参的养殖，包括两种方法：（1）采用所述枯草芽孢杆菌发酵刺参饲料；（2）将所述枯草芽孢杆菌的菌液泼洒在刺参养殖池中。所述菌株一方面能向细胞外分泌脂肪酶，所述脂肪酶可以分解饲料中的脂肪；另一方面能有效抑制刺参腐皮综合征的主要致病菌——灿烂弧菌。

技术领域

本发明属于生物学领域，涉及一株枯草芽孢杆菌，具体涉及一株产脂肪酶而且抑制弧菌 的芽孢杆菌及使用方法。

背景技术

随着水产养殖业的飞速发展，高密度的集约化养殖规模日益扩大，水产养殖的环境恶化 和疾病的危害对水产养殖业的经济损失也愈加明显。而传统的解决办法是采用抗生素；众所 周知，抗生素的使用容易产生耐药性菌株的问题，并且会在体内残留。益生菌是一定浓度范 围内可以对动物体产生有益作用的活的微生物。益生菌通过增强动物对肠内有害微生物群落 的抑制作用，或者通过增强非特异性免疫功能来预防疾病，起到了促进动物生长的作用。因 此，近些年来，作为抗生素的部分领域的替代品，益生菌得到迅速的发展。目前益生菌已经 广泛应用于鱼类、贝类、虾类以及刺参的养殖中。

Bagheri等(2008)研究了将不同浓度的复合芽孢杆菌制剂添加到虹鳟饲料中进行两个月 的投喂，结果发现高浓度的复合益生菌制剂可以明显促进虹鳟生长。Doeschate等(2008)研 究证明南非鲍分离得到的土著益生菌群可以提高其消化酶活力，促进生长。Iehata等(2009) 证明乳酸菌对鲍鱼肠道消化酶活性提高有一定的作用。

发明专利申请201510896838.8提供了“一株地衣芽孢杆菌及包含该菌株的饲料添加剂”。 该发明专利申请具体提供了一株新型地衣芽孢杆菌DN29(Bacilluslicheniformis DN29)，其保 藏编号为CCTCCNO：M2015482。所述的地衣芽孢杆菌DN29，能有效抑制灿烂弧菌和假交 替单胞菌等病原菌，减少养殖动物病害发生的几率，同时还能作为饲料添加剂，显著提高养 殖动物对饲料的利用率，促进动物生长。所述地衣芽孢杆菌DN29可作为益生菌应用于刺参 的养殖生产过程中，对刺参的生长具有显著的促进作用，还可以有效提高刺参的免疫力及对 灿烂弧菌的抵抗能力。

发明专利ZL201410519541.5公开了“枯草芽孢杆菌H4及其制备的腐熟菌剂、腐熟菌剂 的应用”。该发明提供一株新菌株--枯草芽孢杆菌H4，利用该菌株制备的腐熟菌剂具有耐高 温，分泌蛋白酶、脂肪酶以高效发酵动物类废弃物的优点，利用所述腐熟菌剂堆肥具有环境 污染小、经济易行等优点，堆肥处理后的产品经过后续处理，可以作为有机肥料达到变废为 宝的目的。

综上可知，现有技术中报道的芽孢杆菌菌株，有些提高刺参生长和抗病力或免疫力，有 些可以分泌脂肪酶。但目前还没有报道同时可以抑制主要致病菌和分泌脂肪酶的菌株。

发明内容

本发明提供了一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，所述菌株一方面能向细胞外分泌脂 肪酶，所述脂肪酶可以分解饲料中的脂肪；另一方面能有效抑制刺参腐皮综合征的主要致病 菌——灿烂弧菌。

本发明的技术方案：

一株产脂肪酶且抑制弧菌的枯草芽孢杆菌，所述枯草芽孢杆菌命名为枯草芽孢杆菌 ZF003(Bacillus subtilis)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号 为CGMCC No.15645，保藏日期为2018年4月26日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1 号院3号。

所述枯草芽孢杆菌ZF008 16S rDNA序列如SEQ NO.4所示。