[发明专利]一种非种子特异性的启动子及其应用

说明书

本发明提供了一种非种子特异性的启动子及其应用。本发明所提供的启动子序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，或者与SEQ ID NO.2限定的核苷酸序列中至少有90％同源性的核苷酸序列。本发明的启动子可应用于在种子发育的中后期不表达或低表达，而在种子以外的其他组织中启动基因高表达，进而可以用于基因工程中代谢调控、生长、发育、抗病或抗逆等的研究与应用。

技术领域

本发明涉及植物基因工程领域，特别涉及一种非种子特异性表达的 P_BnTC06启动子及其应用。

背景技术

启动子是基因中重要的顺式作用元件，一般位于基因转录起始位点上游。启动子根据转录模式不同可以分为三种：组成型启动子、组织特异性启动子和诱导性启动子。组织特异性启动子的活性受到特定的组织细胞结构和化学、物理信号诱导调节的，即这类启动子的表达具有特定的时空性。在这类启动子的驱动下，基因的表达往往只限于某些特定的器官部位或特定的发育时期。组织特异性启动子不仅能使目的基因的表达产物在一定的器官或组织部位积累，提高区域表达量，同时也可以避免目标基因在其他组织中表达造成的消耗或不利影响。

发明内容

发明人研究发现上游启动子P_BnTC06具有在种子发育中后期不表达或低表达的特性。

基于上述发现，本发明提供了一种非种子特异性启动子。

本发明非种子特异性启动子的序列为：

(1)SEQ ID NO.2所示核苷酸序列；或

(2)与(1)限定的核苷酸序列中至少有90％同源性的核苷酸序列。

本发明还提供了用于植物遗传转化的重组载体，所述载体含有本发明的 SEQ IDNO.2所示启动子。本发明可选用本领域已知的各种载体，只要适合本发明启动子的表达即可，例如可以为市售的植物表达载体及质粒。

本发明同时提供了SEQ ID NO.2所示非种子特异启动子用于目的基因在植物的种子发育中后期不表达或低表达的应用。

本发明的在植物的种子发育中后期不表达或低表达包括在植物的种子发育中后期不表达或低表达、在种子发育前期表达或低表达和在非种子组织中表达或高表达。

本发明进一步提供了一种目的基因在植物的非种子组织中表达的方法，方法包括：将包含目的基因和本发明所述启动子的表达载体转化到植物中进行表达。

有些实施方案中，本发明的目的基因在植物的非种子组织中表达的方法还包括将第二目的基因在植物的种子组织中表达，所述将第二目的基因在植物的种子组织中表达包括：将包含第二目的基因和SEQ ID NO.1所示核苷酸序列启动子的表达载体转化到植物中进行表达，所述第二目的基因与所述目的基因不同。具体的，本发明将分别含有种子特异启动子：SEQ ID NO.1 所示启动子和本发明所述启动子的用于植物遗传转化的真核表达载体，可以使外源目的基因在植物中表达。

具体的，本发明启动子启动GUS基因表达的方法，包括：

(1)将SEQ ID NO.1所示和本发明启动子分别替换pBI121载体中位于GUS基因上游的35S启动子，构成重组质粒；

(2)将所得重组质粒通过农杆菌介导的方法导入模式植物。本发明具有以下积极有益的技术效果：