[发明专利]基于静电吸附的胞外囊泡及其内含物的提取方法及装置

权利要求书

1.基于静电吸附的胞外囊泡及其内含物的提取方法，其特征在于，生物样品经预处理后，加至内部装有阴离子交换树脂颗粒的提取装置中，流出液经所述提取装置底部的端口排出，用清洗缓冲液清洗所述提取装置，弃流出液，然后进行如下I或II操作：

操作I：直接向所述提取装置中加入裂解液，收集的流出液中含有胞外囊泡和/或其内含物；

操作II：清洗后的所述提取装置用洗脱缓冲液进行洗脱，收集的洗脱液中含有胞外囊泡；

其中，所述阴离子交换树脂颗粒表面修饰有以下官能团中的至少一种：季铵、叔胺、仲胺、伯胺。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述树脂选自硅胶树脂、聚苯乙烯树脂、聚丙烯酸树脂。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述阴离子交换树脂颗粒为带季铵官能团的硅胶颗粒。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述阴离子交换树脂颗粒的粒径为30-800μm。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物样品包括血浆、血清、尿液、脑脊液、胸水、腹水、唾液以及细胞培养物上清液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，生物样品的预处理方法为：将所述生物样品离心后，收集上清，上清直接用于后续提取；或者，将上清与上样缓冲液混合后，过滤，收集的滤液用于后续提取。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，生物样品的预处理方法具体为：生物样品于1500-3000g离心10-30分钟，收集上清，将上清与上样缓冲液按适当体积比混合，然后用孔径0.45μm或0.8μm的滤膜过滤，所得滤液用于后续提取。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述清洗缓冲液中至少含有50-500mM的NaCl；所述洗脱缓冲液中至少含有500mM-1M的NaCl。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，所述阴离子交换树脂颗粒与所述生物样品的用量比为0.1-5g：0.1-150mL。

10.基于静电吸附的胞外囊泡及其内含物的提取装置，其特征在于，所述提取装置选自离心吸附柱、移液枪头、固相萃取柱、注射器中的至少一种；

其中，所述离心吸附柱内管的上、下筛板之间填充有阴离子交换树脂颗粒；

所述移液枪头内部与枪头纵轴垂直的方向上平行设置有两块筛板，两块筛板之间填充有阴离子交换树脂颗粒；

所述固相萃取柱的上、下筛板之间填充有阴离子交换树脂颗粒；

所述注射器内部与活塞轴垂直的方向上平行设置有两块筛板，两块筛板之间填充有阴离子交换树脂颗粒；

其中，所述阴离子交换树脂颗粒表面修饰有以下官能团中的至少一种：季铵、叔胺、仲胺、伯胺。