[发明专利]一种优良番茄品种离体培养及微芽嫁接方法

权利要求书

1.一种优良番茄品种离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将选育的具有优良品质的番茄品种通过茎段离体诱导、20-25d增殖培养获得有效苗；

(2)将具有抗土传病害的番茄砧木品种的种子经25-30d诱导培养获得无菌砧木苗；

(3)利用嫁接针将步骤(1)获得的有效苗嫁接在步骤(2)获得的无菌砧木苗上，再经壮苗、生根培养后，得到生长稳定的嫁接苗，经7-10d自然光炼苗，经温室穴盘培养后，移栽到田间定植；

步骤(1)有效苗的具体培养方法为：

1)材料选取与消毒：取出番茄的种子用流水冲洗干净，置于饱和漂白粉上清液中浸泡10min，置自来水下冲滴0.5h，双蒸水冲荡2-3次，在超净工作台内用体积分数为75％酒精消毒30s，加入0.1wt％次氯酸溶液处理10-13min，无菌水冲3-4遍，用消毒滤纸吸干表面水分后进行接种；

2)诱导培养：经步骤1)处理后的种子，接种于经高温高压灭菌的芽诱导培养基中；培养条件：培养室温度为23±2℃，光照时间12h/d，光照强度1000-1500lx，培养时间25-30d；

所述芽诱导培养基的配方为：MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT+0.3mg/LNAA+25g/L糖+6.5g/L琼脂+1.5g/L活性炭+50mg/L氨基青霉素+30mg/L硫酸链霉素，pH5.8；

3)增殖培养：将经诱导培养所得到的生长良好的芽切成长度为2-3cm，接种于增殖培养基中进行增殖诱导培养，光照时间12h/d，光照强度1500-2000lx，增殖培养时间20-25d；

步骤(2)具体为：取出优选番茄砧木种子用流水冲洗干净，置于饱和漂白粉上清液中浸泡10min，自来水下冲滴0.5-1h，双蒸水冲荡2-3次，在超净工作台内用体积分数为75％酒精消毒30s，加入0.1wt％升汞处理10-13min，无菌水冲3-4遍，用消毒滤纸吸干表面水分后接种于经高温高压灭菌的所述芽诱导培养基中，培养条件为培养室温度23±2℃，光照时间12h/d，光照强度1000-1500lx，培养时间25-30d，得无菌砧木苗；

步骤(3)所述的嫁接具体为：砧木苗勿需挖出，用嫁接针剔除其真叶和生长点，左手摄子轻捏砧木苗子叶节，右手持嫁接针，紧贴砧木一片子叶基部内侧向另一片子叶下方斜插，深度0.5～0.8cm，嫁接针尖端不要穿破胚轴表皮，以手指能感觉到其尖端压力为度，嫁接针暂不拔出；然后用刀片在接穗子叶节下0.5cm处呈30°角向下斜切，切口长度0.5～0.8cm，接着从背面再切一刀，使下胚轴呈不对称楔形；拔出嫁接针，将削好的接穗——有效苗插入砧木小孔中，使两者密接。

2.根据权利要求1所述的优良番茄品种离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于：步骤3)所述的增殖培养基的配方为：MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LKT+0.lmg/LNAA+0.01mg/LTDZ+25g/L糖+6.5g/L琼脂+1.5g/L活性炭，pH5.8。

3.根据权利要求1所述的优良番茄品种离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于：步骤(3)所述的温室穴盘培养为：将炼苗后的嫁接苗从试管中取出，洗净根部残留培养基，移栽入装有培养土的培养钵中；穴盘上罩以塑料袋，保持水分，移栽后3～8d浇水1次；待嫁接苗生长稳定后，将上面的塑料袋去除，20～30d后，嫁接苗长大，移栽到田间定植。

4.根据权利要求3所述的优良番茄品种离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于：所述的培养土是由珍珠岩、蛭石、泥炭土、椰糠按质量比1:1:1:1混合而成的。