[发明专利]一种以肿瘤细胞原位生物合成多功能金属纳米探针的方法

说明书

本发明涉及一种以肿瘤细胞原位生物合成金属纳米探针的方法，具体步骤如下：将金属可溶性盐、DNA或RNA链与肿瘤细胞在细胞培养基中共同孵育12‑24小时，然后在1000‑2500 r/min的速率下离心提取出孵育后的肿瘤细胞、用缓冲溶液清洗所述孵育后的肿瘤细胞3‑5次，破碎清洗孵育后的肿瘤细胞，分离、提取所述孵育后的肿瘤细胞内的多功能金属纳米探针，该多功能金属纳米探针具有较好的生物相容性，大大提高了其在生物标记、成像、传感和肿瘤治疗等领域的应用潜能。

技术领域

本发明涉及材料制备领域，特别涉及一种以肿瘤细胞原位生物合成多功能金属纳米探针的方法。

背景技术

原位荧光生物成像在肿瘤诊断分析中具有十分重要的意义。一般对目标分子、肿瘤细胞或组织进行标记并结合光学显微成像技术，实现对肿瘤细胞或组织的生理病变生物过程以及治疗药物对肿瘤细胞或组织作用过程进行可视化的分析和监测。近年来，由于对金属纳米探针研究的白热化，金属纳米探针已经成为标记肿瘤细胞或组织的新兴材料。

近年来，生物相容性好、荧光强度高的金属纳米探针(如金、银等)颇受研究人员的青睐，其尺寸通常小于2 nm，具有强的可见-近红外荧光，与传统的有机染料相比金属纳米探针效率较高，抗光漂白能力较强，斯托克位移较大；其相比半导体量子点生物毒性更小，生物相容性更好。此外，金属纳米探针比表面积大、催化活性高、表面性质可以根据实际应用的要求进行调节，荧光发射波长在紫外、可见和红外范围内可调，所以其在生物标记、成像和传感、单分子光谱、催化、数据存储和化学传感等很多领域都有潜在的应用价值。

迄今为止，已发展了多种金属纳米探针的合成方法，例如水热法、模板合成法、化学还原法、“一锅煮”合成方法等。然而这些方法或多或少存在一些不足，例如基于“一锅煮”方法合成的金属纳米探针表面含有大量的包裹剂，且多数包裹剂含有一些毒性，在进行生物标记或成像的过程中造成细胞的死亡。因此，急切需要研制一种绿色、低能耗、环境友好型的方法来合成金属纳米探针，如，原位生物合成方法，对于深入了解金属纳米探针的性质具有实际意义，同时也为金属纳米探针的合成方法提供了新的思路。

发明内容

本发明针对现有技术中存在的不足，提供了一种以肿瘤细胞原位生物合成多功能金属纳米探针的方法，以解决现有技术中存在的问题。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种以肿瘤细胞原位生物合成多功能金属纳米探针的方法，具体步骤如下：（1）将金属可溶性盐、DNA或RNA链以及肿瘤细胞在细胞培养基中进行孵育12-24小时，其中所述DNA或RNA链通过化学合成；

（2）将溶液在1000-2500r/min的速率下离心提取出孵育后的肿瘤细胞；

（3）用缓冲溶液清洗孵育后的肿瘤细胞3-5次；

（4）破碎清洗孵育后的肿瘤细胞，并进行分离、提取，即可得到多功能金属纳米探针。

作为本发明的一种改进，所述步骤（1）中金属可溶性盐为氯金酸、氯铂酸、硝酸银、氯化亚铁、葡萄糖酸锌、硫酸镁、硫酸铜、可溶性含锰盐中一种或任意几种组合。金属可溶性盐为具有生物相容性的金属元素对应的可溶性盐。

作为本发明的一种改进，所述步骤（1）中肿瘤细胞为肝癌（HepG2）细胞、白血病（K562）细胞、宫颈癌（HeLa）细胞、胶质瘤细胞（U87MG）、肺癌细胞、鼻咽癌细胞、食管癌细胞、胃癌细胞、大肠癌细胞、乳腺癌细胞、淋巴瘤细胞中的一种或任意几种组合。

作为本发明的一种改进，所述步骤（3）中缓冲溶液为磷酸盐缓冲溶液、巴比妥钠-盐酸缓冲溶液、Tris-盐酸缓冲溶液中一种或任意几种组合。

作为本发明的一种改进，所述的多功能金属纳米探针在生物成像中的应用。

作为本发明的一种改进，所述的多功能金属纳米探针在肿瘤治疗中的应用。