[发明专利]一株芽孢杆菌及其在制备微生物种子包衣中的应用

说明书

本发明涉及一株芽孢杆菌及其在制备微生物种子包衣中的应用，属于生物技术领域。一株芽孢杆菌，分类命名为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.15775，保藏日期为2018年5月21日。上述的芽孢杆菌制成微生物种子包衣剂使用。微生物种子包衣剂的制备方法为：将芽孢杆菌、粘合剂、成膜剂和纯净水四者混合均匀，即得。本发明中的巨大芽孢杆菌，不仅耐酸碱，还能降低培养基及土壤的pH值，而且能很好的降解土壤中不能被植物利用的磷，提高土壤肥力，促进植物根系的发育，提高植物对养分的吸收、促进植物的生长。

技术领域

本发明涉及一株细菌及其应用，具体涉及一株芽孢杆菌及其在制备微生物种子包衣中的应用，属于生物技术领域。

背景技术

溶磷菌(Phosphate-solubilizing microorganism,PSM)是土壤中一种特殊的微生物类群，能够将植物难以吸收利用的无效磷转化为可吸收利用的有效磷形态的一类特殊微生物功能的菌群，其在自然及农业生态的磷素生物地化循环中起到了关键作用。溶磷菌可通过分泌各种酶类或有机酸来活化土壤中的难溶态磷，影响植物根系分泌物，促进植物根系对K、N、Ca、Mg、Fe、Zn等营养元素的吸收，促进植物的生长发育，影响根际微生物的群落结构。

芽孢杆菌是溶磷微生物中重要的一类微生物，具有抗逆性强、营养简单、繁殖速度快、有效活菌数量高、性能稳定、储存期长等优势。并且某些菌种还具有防病、促生、溶磷、溶钾、固氮作用，对于发展生态农业，具有重要的现实意义。

目前，溶磷菌多从土壤或者根系土壤中分离筛选所得，主要以菌肥的形式作为微生物菌剂应用，未曾有溶磷菌和种衣剂复配使用的报道。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一株芽孢杆菌。

本发明的第二个目的在于提供该株芽孢杆菌在微生物种子包衣以及土壤解磷中的应用。

为达到上述第一个目的，本发明所采用的技术方案如下：

一株芽孢杆菌，分类命名为巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.15775，保藏日期为2018年5月21日。

于2017年7月5日采集的安徽宿州市萧县(34°11′53.10″，116°58′50.53″)的向日葵根部土壤中分离得到本发明所涉及的芽孢杆菌MN213230；

采用稀释平板法和平板涂布法将样品涂板于有机磷固体培养基上进行分离筛选。

利用引物27F(5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3')和1492R(5'-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3')对菌株MN213230进行扩增和测序，得到序列长度为1405bp，菌株MN213230的16S rDNA序列如序列表所示。通过BLAST将序列与GenBank数据库中序列进行对比，其与Bacillus megaterium的相似性为100，鉴定其为巨大芽孢杆菌Bacillusmegaterium。

为达到上述第二个目的，本发明所采用的技术方案如下：

上述的芽孢杆菌在土壤解磷中的应用。

上述的芽孢杆菌制成微生物种子包衣剂使用。

进一步地，微生物种子包衣剂的制备方法为：

将芽孢杆菌、粘合剂、成膜剂和纯净水四者混合均匀，即得。

更进一步地，微生物种子包衣剂中活菌的数量为1×10⁴cfu/mL～1×10⁸cfu/mL。

更进一步地，所述粘合剂为聚乙烯吡咯烷酮。