[发明专利]血清中多巴胺检测的SERS基底的制备方法、检测方法

权利要求书

1.血清中多巴胺检测的SERS基底的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、Fe₃O₄微纳米球模板的制备：

1.35g的FeCl₃·6H₂O和1.0g聚乙二醇溶解在40mL乙二醇中，室温下磁性搅拌，再加入3.6g醋酸钠溶解完全，将上述混合液转移至反应釜中，200℃恒温下反应8小时，所得的产品先后用二次水和乙醇洗涤二次，60℃干燥8小时后备用；

步骤二、种子生长法合成金纳米粒子

1)金纳米种子制备方法为：99mL二次水和1mL氯金酸先后加入到250mL的三口烧瓶中，140℃油浴加热1小时后，加入4mL柠檬酸钠，沸腾后再加热30分钟；

2)金纳米种子生长方法为：取上述金纳米种子溶液3mL和10mL氯金酸于150mL的三口烧瓶中，用蠕动泵以每分钟0.23mL的速率向其中注入10mL柠檬酸钠和抗坏血酸的混合液，室温下搅拌30分钟；

步骤三、在Fe₃O₄微纳米球表面修饰金纳米粒子

取上述Fe₃O₄微纳米球40mg，分散在20mL二次水中，搅拌15分钟，随后加入100mg聚乙烯亚胺，搅拌2小时；得到的聚乙烯亚胺修饰的Fe₃O₄微纳米球粒子先后用二次水和乙醇洗涤二次，60℃干燥8小时后备用；

取上述聚乙烯亚胺修饰的Fe₃O₄微纳米球5mg，分散在5mL二次水中，超声分散；将利用种子生长法合成的金纳米粒子加入，搅拌1小时，所得的Fe₃O₄/Au粒子先后用二次水和乙醇洗涤二次，60℃干燥8小时后备用；

制备的SERS基底由具磁性的Fe₃O₄微纳米球以及修饰在其表面的金纳米颗粒构成；SERS基底中Fe₃O₄和待测分子多巴胺之间可发生电荷转移，形成配合物，产生强的等离子共振；同时Fe₃O₄和金纳米颗粒在拉曼激发光照下，都可以产生强的电场，使多巴胺的SERS信号增强；Fe₃O₄微纳米球的直径为300nm，金纳米颗粒的直径为20nm。

2.利用如权利要求1所述方法制备的SERS基底检测人体血清中多巴胺的方法，其特征在于，首先采集0.8mL人体血清加入到5mL离心管中，再加入2mL丁醇，利用0.01mol/L的HCl调节混合液的pH值为5，然后以2000转/分钟的速率进行离心2分钟；取上层清液，向其中加入3mL石油醚作为多巴胺分子的萃取液，同时加入1.8mL 0.01mol/L的HCl保持混合液的pH值为弱酸性；将预处理的人体血清与SERS基底混合，将硅片放入到混合液中，利用磁铁进行分离，得到的硅片中即含有磁性基底以及与基底中铁离子形成的配合物的多巴胺分子；对其进行SERS检测，即可得到该分子的SERS谱图。