[发明专利]海参肽及其酶解提取工艺

权利要求书

1.海参肽的酶解提取工艺，包括匀浆、清洗、碱洗、酶解、脱色脱腥、超滤、冷冻干燥，其特征在于，所述海参肽的酶解提取工艺由以下步骤组成：

步骤S1：取新鲜海参，去内脏和杂物后，得到海参体壁；将海参体壁切碎，加入海参体壁质量1～2倍的0℃的水匀浆，获得匀浆液；将匀浆液离心，弃上清液；

步骤S2：重复步骤S1中加水匀浆清洗2～3次，得到清洗后的海参体壁；

步骤S3：向步骤S2得到的清洗后的海参体壁中加入0.1～0.2mol/L的pH8.0的Tris-HCl缓冲液，海参体壁和Tris-HCl缓冲液的固液比为1g：4～5mL，搅拌8～12小时，离心，弃上清液，取沉淀A；向沉淀A中加入2～4℃、0.1～0.5mol/L的氢氧化钠水溶液，沉淀A和氢氧化钠水溶液的固液比为1g：10～20mL，搅拌15～24小时，离心，弃上清液，收集沉淀B；将沉淀B用去离子水洗涤至洗液呈中性，冷冻干燥，得到固体Ⅰ备用；

步骤S4：向步骤S3所得固体Ⅰ中加入0.1～0.8mol/L的酸液，固体Ⅰ和酸液的固液比为1g：8～12mL，混匀后，随后加入固体Ⅰ质量1～3％的胃蛋白酶，于2～4℃提取12～36小时；向提取液中加入氯化钠，使得氯化钠的浓度达到0.5～0.8moL/L，充分搅拌后，于2～4℃离心，取沉淀；将沉淀复溶于0.1～0.5moL/L的乙酸中，在2～4℃下用0.01～0.02moL/L的磷酸氢二钠水溶液透析48～72小时，每隔5～6小时更换一次；将透析液离心，取上清液，冷冻干燥，得到固体Ⅱ；

步骤S5：向步骤S4所得固体Ⅱ中加入水以及固体Ⅱ质量1～3％的混合酶，固体Ⅱ和水的固液比是1g：4～10mL，于50～60℃酶解12～24小时，酶解过程中保持pH在6.8～7.5；将酶解液于90～100℃水浴处理5～10分钟，终止酶反应；

步骤S6：将树脂填入层析柱中，然后把酶解液以1～3mL/min的流速泵入柱内，酶解液和树脂的体积比为3～5：1，收集从泵中流出的酶解液，离心，取上清液；所述树脂为D280；

步骤S7：将步骤S6所得上清液通过截留相对分子质量为6000～10000的中空纤维素膜，在0.15～0.25MPa的压力下进行超滤，得到多肽液；

步骤S8：将步骤S7所得多肽液真空浓缩至固含量为25～30％，冷冻干燥，得到所述海参肽。

2.根据权利要求1所述的海参肽的酶解提取工艺，其特征在于，所述混合酶由碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶按照质量比3：3：4组成。

3.根据权利要求1所述的海参肽的酶解提取工艺，其特征在于，所述酸液为酸的水溶液，所述酸为柠檬酸、乳酸、醋酸中的一种或几种的混合物。

4.根据权利要求3所述的海参肽的酶解提取工艺，其特征在于，所述酸由柠檬酸和乳酸混合而成，其中柠檬酸和乳酸的摩尔比为1：1。

5.海参肽，其特征在于，采用权利要求1～4中任一项所述的海参肽的酶解提取工艺制备得到。