[发明专利]一种草莓花青苷相关基因FvMYB17及其应用

说明书

本发明属于分子生物学中的基因工程领域，具体涉及一种草莓花青苷相关基因FvMYB17及其应用，FvMYB17的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示；研究表明该基因具有促进拟南芥花青苷合成的功能。本发明为利用基因工程技术，对果实色泽的调控提供了理论依据与技术手段，具有很大的应用价值。

技术领域

本发明属于分子生物学、基因工程技术领域，具体涉及一种草莓花青苷相关基因FvMYB17及其应用。

背景技术

草莓是多年生草本植物，蔷薇科草莓属，是世界上消费量最大的浆果之一。草莓属于生长周期短、容易繁殖、植株较小、方便管理的一种水果(谭昌华等，2003)。由于草莓果实特殊的香气和极高的营养价值，因此受到广大消费者的喜爱。草莓果实中存在着大量花青苷，从而导致果实颜色的变化。同时MYB转录因子在植物的次生代谢中有极其重要的作用。

MYB转录因子因其含有一段保守的Myb结构域而得名，它的N端是高度保守的，且含有不完全重复的串联的1-3个R结构域，即R1、R2和R3。根据所含R数量不同可将其分为以下4类：1R-MYB(MYB-related)，R2R3-MYB，3R-MYB，4R-MYB(牛义岭等，2016)。每个R可形成3个α-螺旋，其中第2、3个α-螺旋形成螺旋-转角-螺旋(王希庆等，2003)，第三个螺旋可以识别染色体的大沟。每一个MYB结构域中含有17-19个氨基酸间隔开的3个保守的色氨酸残基，它们具有疏水作用并且对维持螺旋-转角-螺旋有重要的作用。

模式植物拟南芥中R2R3-MYB家族的第四亚族包括AtMYB3、AtMYB4、AtMYB6和AtMYB7基因。Jin(2000)发现AtMYB4拟南芥突变体对UV-B的耐受性增强。与上述基因同源的另一个基因AtMYB7在拟南芥中也可能作为一个新的紫外线保护因子(Fornaléet al.，2014)。通过前人研究可以看出，拟南芥MYB家族的第四亚组中主要在负调控类黄酮和紫外线保护有重要作用。但是我们发现草莓FvMYB17能够促进花青苷的合成，这与模式植物拟南芥中同源基因的功能完全不同。对该基因进行功能研究，阐明其花青苷调控机理，可以有利于在分子方面了解草莓花青苷的合成。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种花青苷合成基因-草莓基因FvMYB17及其应用。本发明的技术方案是从二倍体森林草莓‘Ruegen’中分离得到FvMYB17基因,构建该基因的植物过表达载体，通过农杆菌介导法，将该基因转化到拟南芥中，以实现FvMYB17基因的功能分析。

本发明提供了一种草莓花青苷相关基因FvMYB17，该基因的cDNA序列如SEQ NO.1所示；草莓花青苷合成相关基因FvMYB17编码的蛋白质，所述基因编码的氨基酸序列如SEQID NO：2所示；

本发明提供一种用于扩增草莓花青苷相关基因FvMYB17的引物，包含：

FvMYB17-F:5＇－AAAGGTACCATGAGGAAACCCTGCTGCGA－3＇

FvMYB17-R:5＇－AAAGAATTCTCTGAAGAGAGGAAGCGTGG－3＇

其中，引物5＇端的前3个碱基为保护碱基，紧接着的6个碱基是酶切位点，5＇端前9个碱基是构建过表达载体所需，不属于FvMYB17的基因序列。FvMYB17-R引物由于构建GFP融合表达载体需要，去掉了终止密码子。

本发明提供一种草莓花青苷相关基因FvMYB17的植物过表达载体，所述载

体为pRI101-GFP-CaMV35S-FvMYB17。

本发明提供一种草莓花青苷相关基因FvMYB17在提高植物花青苷含量的应用。

本发明提供一种表达载体pRI101-GFP-CaMV35S-FvMYB17在提高植物花青苷含量的应用。