[发明专利]一种用磁微粒化学发光法检测肌红蛋白含量的试剂盒在审
申请号: | 201810632768.9 | 申请日: | 2018-06-20 |
公开(公告)号: | CN108931652A | 公开(公告)日: | 2018-12-04 |
发明(设计)人: | 金鑫;刘振国;俞佩佩 | 申请(专利权)人: | 泰州泽成生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/543;G01N33/58;G01N33/533 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 陈剑聪 |
地址: | 225300 江苏省泰州市中国医药城*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 发光底物 肌红蛋白 磁微粒 试剂盒 磁微粒化学发光法 检测 抗试剂 校准品 异硫氰酸荧光素 测定试剂盒 包装容器 磁珠偶联 缓冲液 质控品 抗体 羧基 蛋白质 配制 溶解 | ||
本发明公开了一种用磁微粒化学发光法检测肌红蛋白含量的试剂盒,其特征在于,包括校准品、质控品、抗试剂、磁微粒试剂和发光底物;所述磁微粒试剂是将抗异硫氰酸荧光素抗体与羧基磁珠偶联制成,所述发光底物是将ALPS溶解于发光底物缓冲液中制成;将分别配制的肌红蛋白校准品、肌红蛋白质控品、抗试剂、磁微粒试剂、发光底物独立地置于包装容器内,得到肌红蛋白的测定试剂盒。采用该试剂盒进行MYO检测,检测性能大大提高,反应时间大大缩短。
技术领域
本发明属于免疫检测领域,具体涉及一种用磁微粒化学发光法检测肌红蛋白含量的试剂盒。
背景技术
肌红蛋白(MYOglobin,MYO,Mb)是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白,是肌肉内储存氧的蛋白质,它的氧饱和曲线为双曲线型。肌肉中运载氧的蛋白质,由153个氨基酸残基组成,含有血红素,和血红蛋白同源,与氧的结合能力介于血红蛋白和细胞色素氧化酶之间,可帮助肌细胞将氧转运到线粒体。
肌红蛋白的主要功能是在肌肉中有运输和储存氧功能,其作用机理主要是蛋白质的结构决定的。由于铁与卟啉及多肽链氨基酸残基的连接,这种构象非常有利于运氧和储氧功能,同时也使血红素在多肽链中保持稳定。但是过量劳动、劳累、阳光辐射、空气污染、吸烟、农药等会产生过量的自由基。自由基,在化学上叶城“游离基”,是含有一个不成对电子的原子团。原子形成分子式,自由基夺取其他物质的电子被氧化,肌红蛋白是富氧链蛋白,更容易遭到自由基攻击。遭到自由基攻击从而引起多中疾病,如心脏病、老年痴呆症、帕金森病和肿瘤,于肌红蛋白被氧化存在着密切的关系。
测定血清肌红蛋白肌红蛋白可作为急性心肌梗死(AMI)诊断的早期最灵敏的指标。但特异性差,骨骼肌损伤、创伤、肾功能衰竭等疾病,都可导致其升高。MYO阳性虽不能确诊AMI,但可用于早期排除AMI诊断的重要指标,如MYO阴性,则基本排除心肌梗死,还可用于再梗死的诊断,结合临床,如MYO重新升高,应考虑为再梗死或者梗死延展。增高:见于急性心肌梗死早期、急性肌损伤、肌营养不良、肌萎缩、多发性肌炎、急性或慢性肾功能衰竭、严重充血性心力衰竭和长期休克等。在心肌梗死后1.5h即可增高,但1~2d内即恢复正常。
发明内容
为解决现有技术中的上述问题,本发明提供了一种用磁微粒化学发光法检测肌红蛋白含量的试剂盒,采用该试剂盒进行MYO检测,检测性能大大提高,反应时间大大缩短。
所采用的技术方案为:
一种用磁微粒化学发光法检测肌红蛋白含量的试剂盒,包括校准品、质控品、抗试剂、磁微粒试剂和发光底物;所述磁微粒试剂是将抗异硫氰酸荧光素抗体与羧基磁珠偶联制成,所述发光底物是将ALPS溶解于发光底物缓冲液中制成;将分别配制的肌红蛋白校准品、肌红蛋白质控品、抗试剂、磁微粒试剂、发光底物独立地置于包装容器内,得到肌红蛋白的测定试剂盒。
进一步地,还包括清洗液,所述清洗液是将160NaCl、4gKCl、24.2g三羟甲基氨基甲烷(Tris)、1mL吐温20溶于900mL双蒸水中,用HCl调整至PH7.4,用双蒸水定容至1000mL配制而成。
进一步地,所述校准品、质控品、抗试剂按照如下方法配制而成:
A、校准品、质控品的配制:
用校准品缓冲溶液溶解肌红蛋白抗原,配制抗试剂的校准品和质控品;其中,所述校准品缓冲溶液是通过在1L的新生牛血清中加入0.01g-0.05g的四环素和0.1g-0.5g的硫酸新霉素,完全溶解后经过0.22μm滤膜处理制备而成;
B、抗试剂的配制:
1)抗试剂缓冲液的制备:
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