[发明专利]测定磺胺嘧啶混悬液中有关物质的HPLC法

说明书

本发明公开了一种测定磺胺嘧啶混悬液中有关物质的HPLC法，采用乙腈‑0.3％醋酸铵为流动相进行梯度洗脱；采用流动相乙腈‑0.3％醋酸铵来溶解对照品，样品采取先加入定量的氢氧化钠试液溶解后再加流动相稀释。研究表明，采用本发明的流动相和洗脱方式，磺胺嘧啶浓度线性关系良好，能检测出大量的杂质峰，且杂质峰与主峰均能得到有效分离，杂质平均加样回收率高；同时，溶液的制备直接采用流动相来溶解对照品，样品采取先加入定量的氢氧化钠试液溶解后再加流动相稀释，方法操作简便，且可以避免溶剂的影响。可见，本发明专属性强，准确度高，重现性良好，可用于磺胺嘧啶混悬液的质量控制。

技术领域

本发明属于磺胺嘧啶混悬液质量检测技术领域，尤其涉及一种测定磺胺嘧啶混悬液中有关物质的HPLC法。

背景技术

磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)是一类抗菌药物，其抗菌谱广，吸收较迅速，能抑制大多数革兰氏阳性菌和某些革兰氏阴性菌，并对少数真菌、原虫和病毒有抑制作用，常用来治疗上呼吸道感染、肠道感染、皮肤化脓性感染和扁桃体炎等。磺胺嘧啶(sulfadiazine)是一种应用较广的磺胺类药物，它作为一种化学抗菌消炎药物主要用于预防和治疗细菌感染性疾病。磺胺嘧啶混悬液为磺胺嘧啶细微颗粒的混悬水溶液，静置后细微沉淀，振摇后成均匀的白色混悬液，临床上主要用于溶血性链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌等感染。

磺胺嘧啶原料药收载于中国药典(ChP 2015)、英国药典(BP2017)、美国药典(USP40)、欧洲药典(EP9.0)，除中国药典外均有有关物质检查项。磺胺嘧啶混悬液仅收载在中国药典2015年版(ChP 2015)，但是无有关物质检查项。当前药物安全性问题已成为全社会越来越关注的焦点，而有关物质研究及控制是药品安全保证的关键要素之一，各国药品质量标准对有关物质检查的要求也越来越高。有关物质检查研究是目前我国药品研发中的薄弱点之一。要全面提升我国药品研发的水平、切实保证公众用药的安全性，必须重视并加强有关物质的研究。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种操作简便、专属性强、准确度高、重现性良好的测定磺胺嘧啶混悬液中有关物质的HPLC法，以便用于磺胺嘧啶混悬液的质量控制。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

测定磺胺嘧啶混悬液中有关物质的HPLC法，采用乙腈-0.3％醋酸铵为流动相进行梯度洗脱；采用流动相乙腈-0.3％醋酸铵来溶解对照品，样品采取先加入定量的氢氧化钠试液溶解后再加流动相稀释。

色谱条件为：资生堂Capcell PAK MGIIC18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，以0.3％乙酸铵溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱，流速：1.0mL·min^-1，检测波长：260nm，柱温：30℃，进样量：10μl。

梯度洗脱按以下程序进行：

溶液的制备按以下进行操作：

1对照品储备液：分别精密称取磺胺嘧啶对照品51.86mg、杂质A对照品50.76mg、杂质B对照品42.14mg、杂质C对照品51.11mg、杂质D对照品51.07mg，置同一100ml量瓶中，加氢氧化钠试液1ml使溶解，并用流动相稀释至刻度，摇匀，即得；杂质A为2-氨基嘧啶，杂质B为对氨基苯磺酸，杂质C为磺胺脒，杂质D为磺胺；

2对照品使用液：精密量取混合对照品储备液3ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得；

3供试品溶液：精密量取磺胺嘧啶混悬液5ml，置100ml量瓶中，加氢氧化钠试液5ml使溶解，并加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；