[发明专利]一种化学发光时间分辨检测微流控纸芯片及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种化学发光时间分辨检测微流控纸芯片，其特征在于：所述化学发光时间分辨检测微流控纸芯片是以滤纸为基底，在所述基底上设置有进样孔、流通通道以及检测孔；

所述流通通道包括一个主流通通道和多个次级流通通道，所述多个次级流通通道按顺序依次称为二级流通通道、三级流通通道……，n级流通通道，n为≥2的整数；主流通通道的一端连接进样孔，另一端连接检测孔，从主流通通道的中部以一定角度发生偏转分流即为二级流通通道，二级流通通道的一端与主流通通道的中部相连，另一端连接检测孔，以此类推，下一级流通通道的一端与上一级流通通道的中部相连，另一端连接检测孔；下一级流通通道相对于上一级流通通道的偏转方向相同；

所述检测孔内依次置有壳聚糖、特异性氧化酶和化学发光催化剂；所述特异性氧化酶包括葡萄糖氧化酶、尿酸氧化酶、胆固醇氧化酶、乳酸氧化酶、胆碱氧化酶、血红素氧化酶或甘油磷酸氧化酶；所述化学发光催化剂为辣根过氧化物酶或含钴离子的金属盐；

下一级流通通道相对于上一级流通通道的偏转角度相同，为60°；

所述进样孔、流通通道以及检测孔为亲水通道，通过滤纸直接构建；其余部分均为疏水材料。

2.根据权利要求1所述的化学发光时间分辨检测微流控纸芯片，其特征在于：

所述进样孔为圆形，直径为8 mm；检测孔为圆形，直径为6 mm。

3.根据权利要求1所述的化学发光时间分辨检测微流控纸芯片，其特征在于：

所述一级流通通道的长度设置为5 mm，各次级流通通道的长度设置为8 mm，各流通通道的宽度设置为3 mm。

4.根据权利要求1所述的化学发光时间分辨检测微流控纸芯片，其特征在于：

所述滤纸为Whatman 1号滤纸。

5.一种权利要求1-4中任一种化学发光时间分辨检测微流控纸芯片的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：首先在计算机上利用画图软件设计微流控纸芯片图案，制备纸芯片图案的丝网印刷模板，利用石蜡作为疏水材料，通过丝网印刷的方式在滤纸上印制纸芯片图案，随后放入恒温干燥箱，于120℃加热3分钟，使石蜡融化并浸透整个纸的厚度，形成亲疏水的微通道网络，得到微流控纸芯片；

步骤2：将壳聚糖、特异性氧化酶、化学发光催化剂依次加入检测孔中，即得化学发光时间分辨检测微流控纸芯片，4℃下干燥保存。

6.一种权利要求1-4中任一种化学发光时间分辨检测微流控纸芯片的应用，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：将5.0 μL待测样品溶液分别滴加至微流控纸芯片的检测孔中，室温下反应10min；

步骤2：将微流控纸芯片放入超微弱化学发光检测仪中的固定位置，使微流控纸芯片的进样孔正对超微弱化学发光检测仪的进样管管口，将化学发光试剂通过进样管滴加至微流控纸芯片的进样孔中，开始检测；通过依次出现的化学发光峰的峰值大小判断目标物是否存在并对其含量进行测定。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：

所述化学发光试剂为鲁米诺、异鲁米诺或光泽精。