[发明专利]一种抑制肿瘤细胞增殖的苦瓜多肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种抑制肿瘤细胞增殖的苦瓜多肽及其制备方法和应用。所述制备方法包括如下步骤：步骤一：将苦瓜切块备用；步骤二：制备粗研磨料液；步骤三：将粗研磨料液置于‑40～‑80℃下冷冻；步骤四：解冻；研磨，筛网过滤，得细研磨料液；步骤五：冷冻离心机中离心，取上清液；步骤六：高速冷冻离心机中离心，取上清液；步骤七：超滤，膜包孔径为10KD，小于10KD的滤液即为所述苦瓜多肽。该方法可以一定程度的破坏细胞壁，活性物质的溶出率高，再结合超滤技术获得的苦瓜生物活性肽活性较高，而且工艺易于进入产业化。同时，原料苦瓜具有食用安全、无毒副作用、营养价值高等优点。另外，制备得到的苦瓜多肽具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种抑制肿瘤细胞增殖的苦瓜多肽及其制备方法和应用。

背景技术

苦瓜是一种传统的中药材，具有清热消暑、养血益气、补肾健脾、滋肝明目的功效。为葫芦科植物苦瓜的果实。传统上被用于民间药物治疗消化性溃疡，肾结石，湿疹Ⅱ型糖尿病，其次，苦瓜的维生素C含量很高，具有预防坏血病、保护细胞膜、防止动脉粥样硬化、提高机体应激能力、保护心脏，以及苦瓜中的有效成分可以抑制正常细胞的癌变和促进突变细胞的复原抗癌特性等作用。中国自古以来，就把苦瓜当作药用植物来利用。在《救荒本草》和《本草纲目》等古文献里，都曾经提到苦瓜。

生物活性肽是指具有特殊生物活性的多肽。在蛋白质的空间结构中具有生物活性的多肽类，通过相应的技术，可将其释放出来，单独从蛋白链中释放片断，可显示出独特的生物活性。生物活性肽具有丰富的生物学功能，如降胆固醇、改善元素吸收和矿物质运输、免疫调节抗衰老、抗血栓、抗高血压、激素作用、促进生长、抗氧化、调节口味和硬度、食品风味等。所以，生物活性肽是选药物、制疫苗及食品添加剂的天然资源库。近年来，随着科技的进步和人们生活水平的提高，天然产物和功能性多肽成为研究热点。目前研究较多的则是抗菌肽、抗压肽、抗氧化肽、免疫肽及抗肿瘤肽等，这些在医疗保健、食品加工等行业有着较大的影响。

从来源上可以将活性肽分为：动植物源性活性肽、乳源性活性肽、海洋生物活性肽以及家禽动物源性活性肽。从功能上可以将活性肽分为：生理功能活性肽(抗菌肽、神经活性肽、激素肽、激素调节肽、酶调节剂和抑制剂、免疫活性肽、抗氧化肽)和食品感官肽(口味肽、表面活性肽、营养肽)。

目前对功能性生物活性肽的提取方法的研究主要从生物体中直接分离提取天然生物活性肽；通过体外水解蛋白质得到生物活性肽；利用化学法合成或重组DNA技术合成活性肽；或通过物理的方法分离。化学法主要是利用酸碱对蛋白进行水解，这种方法操作简单，反应条件剧烈，获得的肽不能够很好的控制，对后续分离纯化也有一定的影响；酶法水解蛋白是利用生物酶对特定的肽键进行剪切，该方法作用条件温和，可以利用特定的酶定向生产小分子肽，但是该方法水解时间较长；利用DNA技术合成生物活性肽实现了肽的定向生产，该方法主要是利用质粒、噬菌体等载体实现基因工程手段的，但是该方法的安全性不可控。所以筛选出一种作用条件温和、生物活性肽含量高、适于生产的的制备工艺有着重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抑制肿瘤细胞增殖的苦瓜多肽的制备方法，用以解决现有的制备方法反应条件剧烈，获得的肽不能够很好的控制、水解时间较长或者安全性不可控的问题。制备与人体健康密切相关并具有抗肿瘤功能的生物活性肽，其为新型功能性食品及保健品。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种抑制肿瘤细胞增殖的苦瓜多肽的制备方法，所述方法包括如下步骤：

步骤一：将苦瓜切块备用；

步骤二：将苦瓜和液体一起加入到研磨仪中研磨，得到粗研磨料液；

步骤三：将粗研磨料液置于-40～-80℃下冷冻8～24h(或者冷冻过夜)；

步骤四：解冻粗研磨料液；放入研磨仪中研磨，300～500目筛网过滤，得细研磨料液；