[发明专利]一种抗蝎毒血清的提取方法

说明书

本发明是一种抗蝎毒血清的提取方法，包括以下步骤：第一步：选择适龄、健康、无感染的动物，提供优良的卫生条件，保持动物良好的营养状况；第二步：免疫用的蝎毒抗原选用无菌的蝎毒或脱毒蝎毒，免疫抗原为配制稀释成一系列一定浓度的蝎毒液；第三步：前期免疫，所述动物在进行蝎毒免疫前用浓缩破伤风类毒素进行二次前期免疫,以防止后期蝎毒免疫引起的破伤风。本发明提出的动物抗蝎毒血清的提取方法，成本低，过程简单，不会引入其它杂质，能稳定提取高品质的抗蝎毒血清。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种抗蝎毒血清的提取方法。

背景技术

人被毒蝎蛰到后，毒液注入人的皮下组织，毒素通过淋巴液吸收，随着血液循环会分布全身，会造成人体主要脏器官的损伤，若不及时救治，严重者会导致死亡，抗蝎毒血清中含有特异性抗体，与相应的毒蝎抗原结合，会产生无毒性的抗原抗体复合物，起到中和毒素的作用。现阶段，我国的抗蝎毒血清生产厂家较少，纯度不高，收率也较低，不能满足市场的需求。

为此，设计一种抗蝎毒血清的提取方法，解决以上问题。

发明内容

本发明为克服以上不足，提供一种抗蝎毒血清的提取方法，包括以下步骤：

第一步：选择适龄、健康、无感染的动物，提供优良的卫生条件，保持动物良好的营养状况；

第二步：免疫用的蝎毒抗原选用无菌的蝎毒或脱毒蝎毒，免疫抗原为配制稀释成一系列一定浓度的蝎毒液；

第三步：前期免疫，所述动物在进行蝎毒免疫前用浓缩破伤风类毒素进行二次前期免疫,以防止后期蝎毒免疫引起的破伤风；

第四步：初次免疫蝎毒抗原0.1～0.5mg，加佐剂皮下注射，3周后，第二次免疫剂量同上，加佐剂皮下注射，5～7天后，检测其抗体效价，当有明显抗体应答反应后进行超免疫，蝎毒抗原量为0.5～5mg，静脉注射；

第五步：在末次免疫的7～10天后，对所述动物采集血样，检测其抗体效价，抗体滴度达到要求后，选择上午在动物空腹时用无菌取血器械抽取动物的动脉血液，加入原血量体积10％抗凝剂，搅拌使抗凝剂混合均匀；

第六步：将所述血液置于消毒灭菌后的离心管中在4℃下以2500rpm转速离心10～15min，取上清于灭菌袋中，加入凝血酶，搅拌均匀，20～37℃条件下温敷0.5～2h；

第七步：使用消毒灭菌后的离心管以8000～12000rpm转速离心10～15min，取上清即为抗血清，置于灭菌袋中；

第八步：采用膜过滤法去除抗血清中的病毒，γ-射线辐照法进行病毒灭活；

第九步：分离的抗蝎毒血清加防腐剂经检验合格后分装和低温保存。

进一步，第一步中所述动物为4-5岁的动物。

进一步，第一步中所述动物为小白鼠。

进一步，第三步中所述抗原浓度为0.1mg/L及1mg/L。

进一步，第三步中所述佐剂为弗氏完全佐剂。

进一步，第四步中所述抗凝剂为4％的柠檬酸钠。

进一步，第七步中所述膜的孔径为0.5um。

进一步，第八步中所述低温的温度范围是3～4℃。

本发明的有益效果为：

相对于现有技术，本发明提出的动物抗蝎毒血清的提取方法，成本低，过程简单，不会引入其它杂质，能稳定提取高品质的抗蝎毒血清。

具体实施方式

以下将结合本发明的实施例进行详细叙述。