[发明专利]一种用于培养结直肠癌实体瘤原代细胞的培养基在审
申请号: | 201810607728.9 | 申请日: | 2018-06-13 |
公开(公告)号: | CN110592020A | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
发明(设计)人: | 张函槊;尹申意 | 申请(专利权)人: | 北京吉尚立德生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/02;A01N1/02 |
代理公司: | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅;张立娜 |
地址: | 100193 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 结直肠癌 实体瘤 培养基 构建 原代细胞培养物 无血清培养基 悬浮培养体系 原代细胞培养 动物模型 临床诊断 配套试剂 体外培养 体外实验 细胞水平 原代细胞 正常细胞 肿瘤细胞 癌细胞 测序 扩增 配制 治疗 应用 保证 研究 | ||
1.一种用于培养结直肠癌实体瘤原代细胞的培养基,其特征在于:所述培养基由抗菌抗真菌剂三抗、HEPES、GlutaMax、人重组蛋白EGF、人重组蛋白bFGF、人重组蛋白HGF、人重组蛋白Wnt-3a、人重组蛋白Noggin、SB202190、A83-01、PrimocinTM、N-乙酰-L-半胱氨酸、烟碱、N-2 Supplement、皮质醇、B27、ITS-X、Y-27632和Advanced DMEM/F12培养基组成;
其中,所述抗菌抗真菌剂三抗中的青霉素的终浓度为100-200U/mL;所述抗菌抗真菌剂三抗中的链霉素的终浓度为100-200μg/mL;所述抗菌抗真菌剂三抗中的两性霉素B的终浓度为250-250ng/mL;所述HEPES的终浓度为8-12mM;所述GlutaMax的终浓度为0.8-1.2%(体积百分含量);所述人重组蛋白EGF的终浓度为10-100ng/mL;所述人重组蛋白bFGF的终浓度为10-50ng/mL;所述人重组蛋白HGF的终浓度为5-25ng/mL;所述人重组蛋白Wnt-3a的终浓度为200-300ng/mL;所述人重组蛋白R-spondin的终浓度为250-500ng/mL;所述SB202190的终浓度为5-10μM;所述A83-01的终浓度为0.25-1.25μM;所述PrimocinTM的终浓度为1%(体积百分含量);所述N-乙酰-L-半胱氨酸的终浓度为0.5-2mM;所述烟碱的终浓度为5-10mM;所述N-2 Supplement的终浓度为1%(体积百分含量);所述霍乱毒素(Cholera Toxin)的终浓度为0.1-1nM;所述B27的终浓度为1.5-2.5%(体积百分含量);所述ITS-X的终浓度为0.8-1.2%(体积百分含量);所述Y-27632的终浓度为5-20μM;余量均为Advanced DMEM/F12培养基。
2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于:所述培养基为由所述抗菌抗真菌剂三抗、所述HEPES、所述GlutaMax、所述人重组蛋白EGF、所述人重组蛋白bFGF、所述人重组蛋白HGF、所述人重组蛋白Wnt-3a、所述人重组蛋白R-spondin、所述SB202190、所述A83-01、所述PrimocinTM、所述N-乙酰-L-半胱氨酸、所述烟碱、所述N-2Supplement、所述霍乱毒素、所述B27、所述ITS-X、所述Y-27632和所述Advanced DMEM/F12培养基混合而成的溶液。
3.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于:所述培养基中的各组分单独存在。
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