[发明专利]用于鉴定土耳其扁谷盗的实时荧光PCR引物及探针在审
申请号: | 201810607218.1 | 申请日: | 2018-06-13 |
公开(公告)号: | CN110592228A | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
发明(设计)人: | 李志红;陈冬旭 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅;张立娜 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 引物 扁谷 探针 实时荧光PCR 特异性强 近缘种 灵敏度 耗时 直观 研究 | ||
1.用于鉴定土耳其扁谷盗的组合物,由一个引物对和一个探针组成的组合物;所述引物对由引物1和引物2组成,所述引物1的序列如SEQ ID No.1所示,所述引物2的序列如SEQID No.2所示;所述探针的序列为SEQ ID No.3。
2.用于鉴定土耳其扁谷盗的探针,其特征在于:所述探针的序列为SEQ ID No.3。
3.根据权利要求1所述的组合物或权利要求2所述的探针,其特征在于:所述探针的5’端标记有报告荧光染料A,3’端标记有淬灭荧光染料B。
4.根据权利要求3所述的组合物或探针,其特征在于:所述报告荧光染料A为FAM;所述淬灭荧光染料B为BHQ。
5.用于鉴定土耳其扁谷盗的试剂,由权利要求1-4中任一所述的组合物或探针、TaqMan探针荧光PCR扩增缓冲液和水组成。
6.根据权利要求5所述的试剂,其特征在于:所述试剂中还含有参比染料;
具体的,所述参比染料为ROX参比染料。
7.用于鉴定土耳其扁谷盗的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒含有权利要求1-4中任一所述的组合物或探针或权利要求5或6所述的试剂。
8.如下任一所示应用:
(a1)权利要求1-4中任一所述的组合物或探针在制备权利要求5或6所述的试剂或权利要求7所述的试剂盒中的应用;
(a2)权利要求1-4中任一所述的组合物或探针或权利要求5或6所述的试剂或权利要求7所述的试剂盒在鉴定土耳其扁谷盗中的应用。
9.一种鉴定或辅助鉴定待测扁谷盗是否为土耳其扁谷盗的方法,包括如下步骤:
(b1)以待测扁谷盗的基因组DNA为模板,用权利要求1-4中任一所述的组合物进行TaqMan探针荧光PCR反应;
(b2)根据所述TaqMan探针荧光PCR反应的扩增曲线,按照如下确定所述待测扁谷盗是否为土耳其扁谷盗:如果所述待测扁谷盗的Ct值小于等于30,则所述待测扁谷盗为或候选为土耳其扁谷盗;反之,则所述待测扁谷盗不为或候选不为土耳其扁谷盗;所述Ct值所对应的荧光阈值为0.2。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:进行所述TaqMan探针荧光PCR反应的退火温度为60℃。
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