[发明专利]纸芯片及其制备方法以及生物分子检测方法

说明书

本发明公开了一种纸芯片及采用纸芯片的生物分子检测方法以及制备纸芯片的方法，所述纸芯片依次包括：电极层，设置有对电极、参比电极和多个工作电极，其中多个工作电极表面固定有检测材料；叠加在电极层上的分流层，设置有穿过分流层的参比电极导流孔和多个工作电极导流孔，参比电极导流孔和多个工作电极导流孔通过第一导流通路连接；以及叠加在分流层上的进样过滤层，设置有位于进样过滤层上表面的中心分流区和穿过进样过滤层的多个分流导流孔，中心分流区和多个分流导流孔通过第二导流通路连接，待检测液通过进样通路流入中心分流区；其中，待检测液经由分流导流孔和工作电极导流孔导流至工作电极，并经由参比电极导流孔导流至对电极和所述参比电极。

技术领域

本发明的实施例涉及生物检测领域，特别涉及一种纸芯片及采用纸芯片的生物分子检测方法。

背景技术

生物分子例如疾病标志物的检测是了解人体器官功能并进一步评估人体健康的重要手段，例如，临床上主要通过参考基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、基础雌二醇(E2)等临床指标来评估卵巢储备功能。但是，FSH、LH和E2等性激素在人体血液中含量极低，需要较高的检测灵敏度。

对于FSH、LH和E2的检测，目前主要有免疫胶体金试条、免疫生化检测仪、微流控纸芯片等方法。其中，免疫胶体金试条方法操作方便、结构简单，但是其为定性或半定量检测，灵敏度不高；免疫生化检测仪可实现多参数同时检测、检测灵敏度高，但是检测周期长、需样量大、价格昂贵。微流控纸芯片以滤纸为基底材料，可以在一个纸芯片上完成加样、过滤、检测等功能，且结构简单、成本低廉、用样量少，可以实现生物分子的微量、多参数联合检测。

目前采用直接电化学检测方法的纸芯片多为滴加样品、用样量大，并且在纸芯片研制过程中面临不同参数检测相互干扰、低含量性激素易受电极制备修饰条件和环境因素干扰、微沟道和微反应区有待优化的问题。

发明内容

本发明的实施例旨在提出一种多参数检测、灵敏度高的纸芯片，并提供一种采用纸芯片的生物分子检测方法。

根据本发明的一个方面，提出一种纸芯片，依次包括：电极层，所述电极层上设置有对电极、参比电极和多个工作电极，其中所述多个工作电极表面固定有用于检测生物分子的检测材料；叠加在电极层上的分流层，所述分流层上设置有穿过分流层的参比电极导流孔和多个工作电极导流孔，并且所述参比电极导流孔和多个工作电极导流孔通过位于分流层上表面的第一导流通路连接；以及叠加在分流层上的进样过滤层，所述进样过滤层上设置有位于进样过滤层上表面的中心分流区和穿过进样过滤层的多个分流导流孔，所述中心分流区和多个分流导流孔通过位于进样过滤层上表面的第二导流通路连接，待检测液通过位于进样过滤层上表面的进样通路流入中心分流区；其中，所述待检测液经由所述分流导流孔和所述工作电极导流孔导流至所述工作电极，并经由所述参比电极导流孔导流至所述对电极和所述参比电极。

根据一些实施方式，所述分流层包括吸水区，所述吸水区通过位于分流层下表面的排液通路与所述参比电极导流孔连接。

根据一些实施方式，所述分流层包括通过分割线分离的可移除部分和固定部分，所述可移除部分包括参比电极导流孔、多个工作电极导流孔和第一导流通路，所述固定部分包括吸水区；所述分割线将所述排液通路分成位于可移除部分中的第一排液通路部分和位于固定部分中的第二排液通路部分。

根据一些实施方式，所述分割线由穿过所述分流层的打孔线构成。

根据一些实施方式，所述电极层上设置有多个输出电极，所述多个输出电极通过连接线分别与对电极、参比电极和多个工作电极电连接。

根据一些实施方式，所述分流层下表面设置有导线，所述导线的两端分别与电极层的两条连接线电连接；并且所述分割线将所述导线分成位于固定部分中的第二导线部分和位于可移除部分中的第一导线部分，所述第一导线部分与所述电极层的所述两条连接线电连接。