[发明专利]一种蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备方法及蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽和应用

说明书

本发明提供了一种蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备方法，属于功能型食品技术领域，包括蜂王幼虫粉依次经酶解、离心分离、过滤和超滤步骤。本发明提供的制备方法能够制备分子量为[3～5)kDa的活性肽，能够抑制葡萄糖苷酶。

技术领域

本发明属于功能型食品技术领域，具体涉及一种蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备方法及蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽和应用。

背景技术

蜂王幼虫是蜜蜂受精卵在未封盖的王台上，经工蜂喂饲蜂王浆从孵化后至蛹化前的幼虫体，是蜂王浆生产过程中的副产品。蜂王幼虫营养非常丰富，蛋白质含量高，具有很高的食用和药用价值，但目前国内的蜂王幼虫资源只进行简单的加工，或将直接作为原料出口，产品的技术含量和附加值低，绝大多数蜂王幼虫的资源仍未得到有效的开发利用。

相关研究表明，蛋白质在人体消化系统中蛋白酶作用下的水解终产物大多为2～4个氨基酸残基组成的小肽。因小肽结构简单，分子量小，不饱和，所以能够通过细胞膜的渗透以原形直接进入细胞内，而不需要再次消化，也不需要耗费能量。因此小分子肽的吸收、转化和利用，都是高效、完全、彻底的。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备方法，能够得到蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽，该活性肽能够抑制葡萄糖苷酶活性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备方法，包括以下步骤：

1)将蜂王幼虫粉与水混合匀浆，调节匀浆液的pH值为6～7后，与蛋白酶混合，在50～60℃下酶解2～4h，得到酶解液；所述蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、风味蛋白酶或木瓜蛋白酶；

2)将所述步骤1)得到的酶解液进行灭酶处理，将得到的灭酶处理液离心分离，将得到的上清液进行过滤，得到滤液，所述离心分离的速度为4000～5000rpm；

3)将所述步骤2)得到的滤液使用截留分子量为10kDa的超滤膜进行第一次超滤，将得到的第一次超滤液以截留分子量为5kDa的超滤膜进行第二次超滤，得到第二次超滤液；

4)将所述步骤3)得到的第二次超滤液以截留分子量为3kDa的超滤膜进行第三次超滤，得到肽段分子量[3～5)KDa的蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽。

优选的，所述第二次超滤液进行第三次超滤后，将得到的第三次超滤液以截留分子量为1kDa的超滤膜进行第四次超滤，得到肽段分子量为[1～3)KDa的蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽。

优选的，所述第三次超滤液进行第四次超滤后，将得到的第四次超滤液以截留分子量为0.3～0.5kDa的超滤膜进行第五次超滤，得到肽段分子量＜1kDa的蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽。

优选的，所述步骤1)蛋白酶的酶活与蜂王幼虫粉的质量比为(1500～2500)U:1g；

所述蛋白酶酶解的时间为2.5～3.5h。

优选的，所述步骤1)蜂王幼虫粉的质量与水的体积比为1g:(2～6)mL。

优选的，所述第一次超滤、第二次超滤、第三次超滤、第四次超滤和第五次超滤的条件独立的包括：滤液流速为0.5～10L/H，膜元件压力为0～0.8MPa，超滤结束前加入纯水进行洗涤，直至流出的透过液为无色。

本发明还提供了一种蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽，所述蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽的分子量为[3～5)KDa。

本发明还提供了上述技术方案所述的蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽在制备降低血糖药物中的应用。

本发明还提供了上述技术方案所述的蜂王幼虫葡萄糖苷酶抑制活性肽在制备食品中的应用。