[发明专利]一种检测DPEP1基因表达水平的成套试剂及其应用

说明书

本发明公开了一种检测DPEP1基因表达水平的成套试剂及其应用。成套试剂包括引物对DPEP1和探针DPEP1‑probe；所述引物对DPEP1的靶序列含有序列表的序列7所示的特异DNA片段；所述探针DPEP1‑probe为20‑30个核苷酸组成的单链DNA分子，与所述特异DNA片段甲中的部分区段相同或互补。采用成套试剂检测DPEP1基因的表达水平，进而辅助鉴定急性淋巴细胞白血病、辅助预测待测对象患急性淋巴细胞白血病的风险、辅助预测急性淋巴细胞白血病的治疗效果和辅助预测急性淋巴细胞白血病的发生和/或病程进展。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测DPEP1基因表达水平的成套试剂及其应用。

背景技术

DPEP1(Dipeptidase 1)是一种位于人16q24.3染色体上的锌金属肽酶，也被称为膜二肽酶、微粒体二肽酶或肾二肽酶，是一种能水解多种二肽并参与谷胱甘肽代谢的锌金属肽酶，在谷胱甘肽以及肿瘤相关的促炎分子白三烯的调控中起着重要作用。

研究表明，DPEP1在多种肿瘤中表达异常，但其表达水平和预后意义在不同类型的肿瘤中尚存在争议，Wilms肿瘤中DPEP1的表达缺失，乳腺癌和胰腺导管腺癌中DPEP1的表达降低，结肠癌中DPEP1的表达增高，并且DPEP1的高表达与不良预后相关。在结肠癌、Wilms肿瘤、乳腺癌及胰腺导管腺癌患者中，DPEP1的异常表达影响了肿瘤细胞对化疗药物的敏感性以及侵袭浸润能力，并与肿瘤病人的预后有密切关系。目前尚未见DPEP1在血液恶性疾病的相关研究。

发明内容

本发明的目的是辅助预测急性淋巴细胞白血病的发生和/或病程进展。

本发明首先保护一种成套试剂。所述成套试剂可包括引物对DPEP1和探针DPEP1-probe；所述引物对DPEP1可由引物DPEP1-F和引物DPEP1-R组成；所述引物对DPEP1的靶序列可含有特异DNA片段甲；所述特异DNA片段甲可为如下y1)或y2)：

y1)序列表的序列7所示的单链DNA分子；

y2)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子；

所述探针DPEP1-probe可为20-30个核苷酸组成的单链DNA分子，与所述特异DNA片段甲中的部分区段相同或互补。

所述引物DPEP1-F可为如下a1)或a2)：

a1)序列表中序列1所示的单链DNA分子；

a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的单链DNA分子。

所述引物DPEP1-R可为如下b1)或b2)：

b1)序列表中序列2所示的单链DNA分子；

b2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的单链DNA分子。

所述探针DPEP1-probe可为如下c1)或c2)：

c1)序列表中序列3所示的单链DNA分子；

c2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的单链DNA分子。

所述探针DPEP1-probe的末端可具有荧光标记。所述探针DPEP1-probe的5’末端和/或3’末端可具有荧光标记。所述探针DPEP1-probe的5’末端可具有FAM荧光标记，3’末端可具有BHQ荧光标记。

所述成套试剂中，所述引物DPEP1-F、所述引物DPEP1-R和所述探针DPEP1-probe的摩尔比具体可为40:40:25。