[发明专利]一种金荞麦的快繁方法

说明书

本发明涉及一种金荞麦的快繁方法，其主要改进之处为，通过改进MS培养基的组成，提出一种适用于金荞麦的组织培养方法，其主要步骤包括丛生芽诱导、丛生芽增殖和生根培养。本发明的方法可快速地繁殖大量的金荞麦植株，按二十粒种子计算，经无菌繁育体系建立40天后，再每代25天的增殖培养6代，以及30天的生根培养，可获得约120万株组培生根苗，历时不到一年，可为规模化种植短期内提供大量种苗。

技术领域

本发明涉及金荞麦的繁殖技术领域，具体涉及一种通过组织培养来快速繁殖金荞麦的方法。

背景技术

金荞麦Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara为蓼科荞麦属植物，以根入药，具有清热解毒，排脓祛瘀的功效，主要用于肺痈吐脓，肺热喘咳，乳蛾肿痛。金荞麦主要分布于西南、华南、华中、华东各省以及陕西，生于海拔250～3200米的山谷湿地、山坡灌丛中。目前以本植物作为药材的来源主要为野生资源，近年来随着土地过度开发以及各种环境污染和生态环境的破坏，金荞麦野生资源已大量减少，濒临灭绝，1999年被列入国家Ⅱ级重点保护植物。近年来各地纷纷开展金荞麦种植技术研究，其繁以种子繁殖为主，根茎切芽繁殖为辅。但种子存在发芽率低，发芽不齐等情况，而块茎切芽繁殖繁殖率极低，极大的限制了种植技术的突破及种植规模。

发明内容

针对现在技术在金荞麦繁殖中存在的问题，本申请提出一种通过组织培养来快速繁殖金荞麦的方法，包括如下步骤：

1)将表面消毒后的金荞麦种子接种于出芽培养基中，诱导出丛生芽，所述出芽培养基的配方为改良MS培养基+1.0～4.0mg/L赤霉素；

2)将所述丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中，诱导生根，得金荞麦幼苗，所述生根培养基的配方为改良MS+0.5～1.0mg/L萘乙酸+0.5～2.0mg/L吲哚乙酸+0.5～1.0g/L活性炭。

所述改良MS培养基的配方为：硝酸铵2.15g/L，磷酸二氢钾0.17g/L，硫酸镁0.37g/L，硝酸钾2.30g/L，氯化钙0.44g/L，EDTA-Na237.3mg/L，亚硫酸铁27.8mg/L，肌醇100.0mg/L，烟酸0.5mg/L，甘氨酸2.0mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，盐酸硫胺素0.1mg/L，碘化钾0.83mg/L，硼酸6.20mg/L，硫酸镁16.90mg/L，氯化钴0.025mg/L，硫酸锌8.6mg/L，钼酸钠0.25mg/L和硫酸铜0.025mg/L。

本发明针对金荞麦的组织培养，对MS培养基的配方进行了优化，并提出了适宜的组织培养的操作步骤，针对每一个操作步骤，给出了适宜的培养基，可快速大量地繁殖金荞麦。

优选的，所述步骤1)中诱导得到丛生芽后，将所述丛生芽切成约1～2cm的带芽茎段，接种于改良MS+0.05～0.20mg/L吲哚乙酸+0.5～2.0mg/L 6-苄基氨基嘌呤+0.5～2.0mg/L激动素的增殖培养基中进行从生芽增殖培养。本发明所述的金荞麦种子取自于野外，因此外植体携带的杂菌较多，在出芽阶段容易出现污染，若直接以出芽后的材料诱导生根，最终所得的植株也易出现污染。通过对发芽阶段未污染的芽进行增殖培养，可有效地控制污染，有利于后续大量的生根。而且，在丛生芽诱导阶段，丛生芽的诱导发生率约为50％，通过在上述培养基中进行增殖培养，增殖系数为4～5，可大大地增加丛生芽的数量，而且针对于同一批丛生芽，可增殖培养多次，有利于芽的快速大量繁殖。

优选的，所述出芽培养基的配方为改良MS培养基+2.8～3.2mg/L赤霉素；

和/或，所述增殖培养基的配方为MS+0.09～0.11mg/L吲哚乙酸+1.4～1.6mg/L 6-苄基氨基嘌呤+1.4～1.6mg/L激动素；

和/或，所述生根培养基的配方为改良MS+0.9～1.0mg/L萘乙酸+1.4～1.6mg/L吲哚乙酸+0.9～1.0g/L活性炭。