[发明专利]以玉米秸秆酸处理水解液生产微生物油脂的方法

权利要求书

1.以玉米秸秆酸处理水解液生产微生物油脂的方法，其特征在于，具体步骤如下：

步骤1，玉米秸秆粉末加入到质量浓度为1％～3.5％的稀硫酸溶液，在110～200℃下预处理15～30min，过滤得到玉米秸秆干物；

步骤2，在玉米秸秆干物中加入纤维素酶与木聚糖酶组成的复配酶溶液，水解得到玉米秸秆水解液；

步骤3，在玉米秸秆水解液中加入终浓度为6.8～10.2g/L的酵母粉，1.1～3.3g/L的(NH)₂SO₄，3～9g/L的KH₂PO₄和Mg₂SO₄·7H₂O，溶解后调节pH至5～7，灭菌，得到发酵培养基；

步骤4，在发酵培养基接种解脂耶氏酵母NRRL Y-1095，动态培养，发酵结束后，离心收集菌体，菌体经破碎后采用氯仿-甲醇法提取得到油脂。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1中，所述的玉米秸秆粉末与稀硫酸溶液的质量比为1:9。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中，所述的纤维素酶与木聚糖酶的质量比为7:3。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中，所述的玉米秸秆水解液制备的具体步骤如下：

将玉米秸秆干物烘干后，按复配酶按照20mg酶蛋白/g葡聚糖的酶加量，在50℃、250rpm条件下水解预处理后的秸秆干物24小时，并在6000r/min转速下离心15min，得到玉米秸秆水解液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3中，所述的调节pH至5.8。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3中，所述的调节pH所用的碱为NaOH。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4中，所述的解脂耶氏酵母NRRLY-1095的接种量为5～7％，发酵条件为30℃，180～250r/min，培养时间为96～120小时。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4中，所述的离心速度为8000～12000rpm，离心时间为5～10min。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4中，所述的氯仿-甲醇法提取油脂的具体步骤为：在湿菌体中加入4mol/L HCl，于78℃水浴处理1.5～2h，冷却后，加入甲醇，充分振荡，按甲醇：氯仿＝1：1(V/V)加入氯仿，振荡，离心，收集氯仿层，在剩余混合液中再加入氯仿，充分振荡，离心，收集氯仿层，合并氯仿提取液，将收集到的氯仿提取液烘干，冷却得到油脂。