[发明专利]软骨修复用海藻提取物及其制备方法

权利要求书

1.软骨修复用海藻提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：称取海藻粉100g，加入海藻粉重量5倍的无水乙醇，混合均匀，于65℃水浴回流脱脂30分钟，使用纱布过滤，取滤渣；将滤渣置于通风处使乙醇完全挥发，得到脱脂海藻粉；

步骤2：称取脱脂海藻粉30g，以物料比1：20（g/mL）加入煮沸后冷却至90℃的水，于90℃保温回流提取2小时，而后自然冷却至30℃，以4500转/分钟离心10分钟，收集上清液A；

步骤3：向步骤2得到的上清液A中加入40mL浓度0.05g/mL的三氯乙酸溶液，于4℃放置12小时后，以4500转/分钟离心20分钟，取上清液B；将上清液B在蠕动泵的推送下通过截流分子量10KDa的超滤膜，维持压力在0.2MPa，收集透过液；

步骤4：向步骤3收集得到的透过液中加入260mL浓度为0.01g/mL的十六烷基三甲基溴化铵水溶液，加入过程中保持搅拌，转速为100转/分钟；加料完毕后，以7000转/分钟离心10分钟，取沉淀；将沉淀依次用醋酸钠饱和乙醇溶液、无水乙醇洗涤，沉淀和醋酸钠饱和乙醇溶液以及无水乙醇的物料比为1：30：50（g/mL/mL），于40℃、绝对压强0.03MPa的真空干燥箱中烘干至恒重，将得到的固体物质保留备用；

步骤5：将步骤4得到的固体物质使用蒸馏水配制成为浓度6mg/mL的溶液；取200mL上述溶液放入聚四氟乙烯消解罐中，加入50mL浓度8%的双氧水，于50℃超声降解6小时，超声功率1200W；将降解后的反应液用0.01mol/L的氢氧化钠水溶液中和至中性，经过孔径0.45µm的水膜过滤，除去固体杂质，保留滤液；向滤液中加入3倍体积的无水乙醇，混合均匀，于4℃放置12小时，用纱布过滤，取滤渣；滤渣用无水乙醇洗涤，滤渣和无水乙醇的物料比为1：10（g/mL），于40℃、绝对压强0.03MPa的真空干燥箱中烘干至恒重，得到所述海藻提取物；

所述海藻粉采用以下方法得到：将海藻用自来水冲洗干净，于105℃干燥2小时，粉碎，过40目筛，得到粗粉；将粗粉置于pH值为2.5的盐酸溶液中浸泡24小时进行一次水解，粗粉和盐酸溶液的物料比为1：3（g/mL），用纱布过滤收集滤饼Ⅰ；滤饼Ⅰ用蒸馏水冲洗至洗液呈中性，再置于pH值为4.5的盐酸溶液中浸泡12小时进行二次水解，滤饼Ⅰ和盐酸溶液的物料比为1：3（g/mL），用纱布过滤收集滤饼Ⅱ；将滤饼Ⅱ用蒸馏水冲洗至洗液呈中性，于105℃干燥2小时，粉碎，过40目筛，得到海藻粉；

所述海藻为褐藻、红藻、蓝藻。

2.软骨修复用海藻提取物，其特征在于，采用权利要求1所述的软骨修复用海藻提取物的制备方法加工得到。

3.根据权利要求2所述的软骨修复用海藻提取物，其特征在于，由褐藻提取物30重量份、红藻提取物30重量份、蓝藻提取物30重量份组成。

4.根据权利要求3所述的软骨修复用海藻提取物，其特征在于，所述软骨修复用海藻提取物的剂型为凝胶、胶囊、乳膏。

5.权利要求4所述的软骨修复用海藻提取物在制备治疗类风湿关节炎的药物中的应用。