[发明专利]一种栝楼种苗快繁的方法

说明书

本发明涉及一种栝楼种苗快繁的方法，通过采用已经脱毒的已知雌雄的栝楼组培苗作为培养材料，能够定向生产大量脱毒栝楼雌株或雄株；本发明所述方法通过在再生植株母株上分批次剪取枝条来进行继代培养，实现了在同一再生植株母株上重复多次取材来进行培养；本发明采用的培养基，调整了MS培养基中硝态氮与氨态氮的比例，增加了磷酸二氢钾及铁盐的量，并加入了一定比例的生长素，能够使再生植株母株多次萌发新的枝条，作为继代培养以产生更多的继代再生植株，并且显著减少了植株黄化、叶片成勺状、叶缘焦枯的现象。本发明一次取材，多次扩繁，操作简单，效率高，可周年生产，实现栝楼种苗大规模生产，具有广阔的市场应用前景。

技术领域

本发明属于植物生物技术组织培养领域，具体涉及一种栝楼种苗快繁的方法。

背景技术

栝楼别名吊瓜、瓜蒌，其根、果、果皮、种子均可入药，其中，栝楼种子又名吊瓜子，为天然绿色休闲食品。栝楼为雌雄异株植物，雌性栝楼和雄性栝楼有不同的收获部位，具有不同的药用价值和经济价值，因此在人工栽培种控制栝楼雌雄植株的比例十分必要。以收获根为目的，可以种植100％的雄性栝楼，而以收获栝楼果、果皮、种子为目的则栽培的雌雄比例为10:1为宜，而自然分化的雌雄植株比例为3:7，这个比例对不同种植目的都不合适，而依据种子或幼苗对栝楼进行性别鉴定的技术暂未见报道。因而，通过种子播种繁殖，不仅需要大量的种子播种，栽培种植到开花结果才能够分辨雌雄株，浪费人力、物力、空间。因此，对栝楼进行雌雄定向繁殖则显得尤为重要。

发明专利CN104521756B公开了一种生产栝楼组培苗的方法，但是其中采用的培养材料未经脱毒处理，培养的组培苗易携带病毒影响种苗质量，从而影响栽培生产，另一方面，继代培养所选的材料为再生植株，即在增加再生植株数量的同时，需要消耗一批再生植株用来扩繁，间接减少了再生植株的数量，繁殖率降低，进一步，再生植株多次转接在新的同一种培养基中进行继代培养，容易产生激素积累，造成激素失调，影响种苗质量。且使用的MS培养基中部分元素的配比不适合栝楼的培养，组培苗容易黄化、叶片成勺状、叶缘焦枯。

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种栝楼种苗快繁的方法。

本发明的技术方案为：

一种栝楼种苗快繁的方法，包括如下步骤：

(1)从栝楼种苗取材，得到组培苗，脱毒后，得到脱毒的组培苗；

(2)将所述脱毒的组培苗接种于培养基中进行培养，得到再生植株母株；

(3)剪取所述再生植株母株的部分枝条，将所述枝条剪成多节茎段，然后将所述多节茎段均接种于新的培养基中进行继代培养，得到多个继代再生植株；将剪枝后的再生植株于原培养基中继续培养；

(4)待步骤(3)所述剪枝后的再生植株长出新的枝条后，重复步骤(3)，得到新一批继代再生植株，重复进行多次继代培养，最后将全部继代再生植株和再生植株母株出瓶移栽，即得栝楼种苗。

步骤(1)中，所述组培苗为雌性带腋芽的茎段、雌性带根的完整植株、雌性芽丛、雄性带腋芽的茎段、雄性带根的完整植株、雄性芽丛中的任意一种。

步骤(1)中，进行所述脱毒的方法包括如下步骤：

将所述组培苗在温度为31℃-34℃、光照强度为2000-3000Lux、光照时间为12小时/天的培养条件和温度为39℃-42℃、光照强度为2000-3000Lux、光照时间为12小时/天的培养条件下交替培养，每种培养条件下培养1-2天，总共培养10-15天后，在解剖镜下剥取0.3±0.2mm的茎尖，接种于培养基中，先进行暗培养3-4天，然后以每2-3天增加500Lux的速度将光照强度逐渐增加至2500Lux，且每天光照12小时，在所述光照条件下培养25-35天后，即得脱毒的组培苗。