[发明专利]一种聚阳离子基因载体、其制备方法及其应用

权利要求书

1.一种聚阳离子基因载体，由接枝骨架和与所述接枝骨架接枝的对甲苯磺酰基保护的精氨酸制得；

所述接枝骨架的原料选自树枝状聚酰胺-胺、分子量为2000~100000g/mol的超支化聚赖氨酸或分子量2000~50000g/mol的线性ε-聚赖氨酸；

所述树枝状聚酰胺-胺选自型号PAMAM-G3、型号PAMAM-G4和型号PAMAM-G5中的任意一种；

所述树枝状聚酰胺-胺和对甲苯磺酰基保护的精氨酸的物质的量比为1:5~80；

所述分子量为2000~100000g/mol的超支化聚赖氨酸与对甲苯磺酰基保护的精氨酸的物质的量比为1:5~400；

所述分子量2000~50000g/mol的线性ε-聚赖氨酸与对甲苯磺酰基保护的精氨酸的物质的量比为1:5~200。

2.一种权利要求1所述聚阳离子基因载体的制备方法，包括以下步骤：

a)将活化的对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸溶液和接枝骨架原料溶液反应，透析，冻干，得到冻干产物；所述接枝骨架原料溶液中的接枝骨架原料选自树枝状聚酰胺-胺、分子量为2000~100000g/mol的超支化聚赖氨酸或分子量2000~50000g/mol的线性ε-聚赖氨酸；所述树枝状聚酰胺-胺选自型号PAMAM-G3、型号PAMAM-G4和型号PAMAM-G5中的任意一种；

b)将所述冻干产物和三氟乙酸反应，沉降反应产物，得到聚阳离子基因载体。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中活化的对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸溶液按照以下方法制得：

将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、1-羟基苯并三唑加入到对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸溶液中，进行活化，得到活化的对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸溶液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸与所述接枝骨架原料的质量比为4.5~5.5:1；

所述对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸溶液中对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸的质量与溶剂的体积比为1g：（9~12）mL。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述活化的温度为15~35℃；活化的时间为0.5~2h。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中反应的温度为15~35℃；所述步骤a)中反应的时间为80~120h。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中反应的温度为15~35℃；所述步骤b)中反应的时间为3~5h。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中透析的时间为65~80h；冻干的温度为-60~-80℃。

9.一种纳米复合物颗粒，包括权利要求1或权利要求2~8任一项所述制备方法制备的聚阳离子基因载体和负载在聚阳离子基因载体上的基因；

所述基因为pDNA或siRNA。