[发明专利]一种新型天然茶树花衍生脂质纳米囊泡的制备及其应用

说明书

本发明公开了一种新型天然茶树花衍生脂质纳米囊泡的制备及其应用。该纳米囊泡是从茶树花中通过多次离心的方式提取，可作为一种天然可食用的纳米药物用于治疗疾病。通过对纳米囊泡进行一系列表征显示，该纳米囊泡粒径较为均一，为131.6±1.6 nm，色谱分析显示该纳米囊泡天然负载着多种儿茶素成分。通过将不同浓度梯度的纳米囊泡与多种恶性肿瘤细胞共培养显示，该纳米囊泡可以有效地抑制乳腺癌、结肠癌、非小细胞肺癌以及宫颈癌等癌细胞的增殖，表现出良好的抗癌效果和广谱抗癌性能。目前对于茶树花的衍生药物制剂及商业化开发并未引起科研人员及医药公司的广泛关注，因此该发明有力地证明了茶树花有着很好的药物应用前景。

技术领域

本发明涉及茶学、药剂学、药理学及生物纳米材料等领域，具体涉及一种新型天然茶树花衍生脂质纳米囊泡的制备、表征其在恶性肿瘤治疗中的应用。

背景技术

茶树花，作为茶树重要的组成部分，内含多种活性有机物质，被视为一种天然的中药材。但由于人们对茶树花了解不深，重视程度远低于茶叶，进而导致其尚未得到有效的开发和利用。自2002年徐纪英老师首次提出“茶树花资源的综合利用”这一理念以来，人们逐渐开始对茶树花开展一系列的研究。目前已有的研究结果表明，茶树花有着与茶叶类似的生化成分，包括茶多酚、蛋白质、维生素类、咖啡碱、多糖、黄酮类、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶等。其中，茶多酚作为一种常见的抗氧化物质，被诸多研究人员证明其有很好的抗癌性能。茶树花中茶多酚含量较多，尤以儿茶素占到了很大的比例，高达约70%，由EGCG、ECG、EC等多个单体组成。在我国传统医学学说中，“药食同源”理论一直被大家沿用至今，茶花作为一种可食用性、抗氧化活性表现良好的天然材料，有着巨大的临床药用潜能。

近几年，研究人员发现，新鲜植物中普遍存在着一种天然脂质纳米囊泡，其内部包含有许多不同种类的有机小分子、核酸等活性物质，可以作为一种很好的纳米药物用于部分疾病的研究。相较于目前热门的纳米药物而言，天然脂质纳米囊泡有着更好的生物相容性，免去了纳米粒子制备过程中有机溶剂的使用，克服了纳米药物无法大批量生产等问题。2013年，美国Huang-ge Zhang 课题组首次从葡萄柚中提取得到一种脂质纳米囊泡，该种纳米囊泡可以装载不同抗体或核酸等治疗分子用于肿瘤等疾病的治疗（X. Hou et al.Biomaterials 2017: 124; 195-210）。随后，该课题组又证实葡萄中同样存在着类似结构的物质，可以有效地治疗由葡聚糖硫酸钠诱导的急性溃疡性结肠炎疾病(S. Ju et al.Mol. Ther. 2013: 21; 1345-1357)。最近，Huang-ge Zhang 课题组和美国DidierMerlin 课题组均从生姜中得到了类似的纳米脂质囊泡，分别用于酒精引起的肝病、急性结肠炎、慢性结肠炎和结肠癌的治疗，均有着良好的治疗效果(M. Zhang et al.Biomaterials 2016: 101; 321-340. M. Zhang et al.Mol. Ther. 2016: 24; 1783-1796. X. Zhuang et al.J. Extra. Ves. 2015: 4; 28713.)。

发明内容

鉴于此，本发明的目的在于从新鲜茶树花中提取一种天然脂质纳米囊泡，该纳米囊泡天然装载多种儿茶素成分，表现出较好的抑制肿瘤细胞增殖的能力，可用于多种恶性肿瘤的化学治疗。

本发明的技术方案具体如下：

一种新型天然茶树花衍生脂质纳米囊泡的制备方法包括以下步骤：

（1）将新鲜茶树花组织放至榨汁机中搅拌破碎，得到组织原浆；

（2）将步骤（1）得到的组织原浆在4^oC条件下离心，保留组织上清液；