[发明专利]一种源内二硫键碎裂的电喷雾离子源有效
申请号: | 201810566170.4 | 申请日: | 2018-06-05 |
公开(公告)号: | CN109037024B | 公开(公告)日: | 2020-04-24 |
发明(设计)人: | 朱一心;吕婷婷 | 申请(专利权)人: | 浙江好创生物技术有限公司 |
主分类号: | H01J49/16 | 分类号: | H01J49/16 |
代理公司: | 浙江英普律师事务所 33238 | 代理人: | 陈小良 |
地址: | 311121 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 二硫键 碎裂 喷雾 离子源 | ||
本发明公开了一种分析仪器领域,具体是指一种用于源内二硫键碎裂的电喷雾离子源生成的仪器。本发明包括中空毛细管发射针、中空毛细管发射针支架,其中中空毛细管发射针支架的中间为贯通空腔,中空毛细管发射针支架的前端空腔内有一个中空毛细管发射针,中空毛细管发射针的外周放置有紫外灯,中空毛细管发射针与离子束团汇集于离子化室。本发明的优点是具有更直观的二硫键碎裂效率,含有二硫键的多肽生物大分子碎裂前后的分子离子出现在同一张质谱图中,是目前一种用于二硫键快速分析较为理想的电喷雾离子源。
技术领域
本发明涉及一种分析仪器领域,具体是指一种用于源内二硫键碎裂的电喷雾离子源生成的仪器。
背景技术
自从80年代中期,2002年诺贝尔化学奖获得者之一John B.Fenn将电喷雾离子源应用于大分子质谱分析以来,20多年过去了,对于电喷雾离子源机理,还是停留在两个模式:Ion Evaporation Model(IEM)离子蒸发,与Charged Residue Model(CRM)电荷残留机理。电喷雾离子源的基本结构与90年代的没有本质上的区别。
电喷雾离子源的基本结构就是在一个中空的金属或玻璃毛细管中间充满液体,对着质谱仪的离子入口,在液体上加上正或负高电压,在大气中形成正负离子,质谱仪的真空系统将一部分离子吸入质谱仪的质量分析器。
对于电喷雾离子源,尽管电离几率很高,几乎达到100%,但是将分子离子传输到质谱质量检测器的有效离子,只有总离子数的0.01%到0.1%之间。
为了解决上述问题,很多发明人发明了不同机构的电喷雾离子源,参考专利号为:美国US4861988、US5412208、US5432343、US6992299、US5504329。但是所有的发明都是将电喷雾离子源的发射针尖处在大气之中,离子流与液体流量关系密切,无法在大流量范围内100纳升/分~100微升/分得到稳定的离子发射,并且离子传输效率没有得到明显的改善。
二硫键是一种常见的蛋白质翻译后修饰,对稳定蛋白质的空间结构,保持及调节其生物活性有着非常重要的作用。确定二硫键在蛋白质中的位置是全面解析含有二硫键蛋白质化学结构的必要条件。目前分析二硫键在蛋白质中的位置的方法是,比较蛋白质在二硫键打开之前和二硫键打开之后,用胰蛋白酶,酶解蛋白质所得到的肽段的差异。必须先用还原剂,如二硫苏糖醇,三(2-羧乙基)膦等,打开二硫键,然后用,烷化剂,如碘乙酰胺,将不稳定的SH基团烷化,使每个半胱氨酸的质量增加了57道尔顿。经过这两步处理的蛋白质,其二次结构已被打开,有利于进一步的胰蛋白酶酶解。由于二硫键打开后的两个肽段通常在色谱中有不同的保留时间,而二硫键未打开的两个肽段,其保留时间也不同,所以两种情况下肽段的比较要在全色谱时间内进行,大大增加了计算的难度。
发明内容
本发明针对现有技术中的不足,提出一种高效、设计合理、结构简单,高电离几本发明的目的是提供一种设计合理、结构简单,高电离几率以及离子发射稳定的电喷雾离子源。率以及离子发射稳定的仪器。
本发明的目的是提供一种设计合理、结构简单,高电离几率以及离子发射稳定的电喷雾离子源。
本发明的目的是采用这样的技术方案实现的:它包括中空毛细管发射针;发射针支架,发射针支架在发射针的周围形成一个向前流动的层流气体中空毛细管发射针暴露在紫外光中,含有二硫键的医药小分子和生物大分子,经过紫外光的照射,将其二硫键碎裂,二硫键碎裂后的碎片分子,通过发射针尖端以后,形成离子束团,并且通过辅助气体提高离子源离子信号的信噪比,最终得到稳定的离子流,并且含有二硫键的多肽生物大分子碎裂前后的分子离子出现在同一张质谱图中。
一种源内二硫键碎裂的电喷雾离子源,它包括中空毛细管发射针、中空毛细管发射针支架,其特征在于:中空毛细管发射针支架的中间为贯通空腔,中空毛细管发射针支架的前端空腔内有一个中空毛细管发射针,中空毛细管发射针的外周放置有紫外灯,中空毛细管发射针与离子束团汇集于离子化室。
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