[发明专利]一种鉴别蜂王浆制剂中10-HDA的方法

说明书

本发明属于检测分析技术领域，具体涉及一种鉴别蜂王浆制剂中是否掺入人工合成的10‑HDA的分析鉴别方法，该方法采用硅胶柱层析纯化方法前处理待检样品，得白色固体，然后利用反相‑高效液相色谱法检测，固定相为ODS‑C18反相柱，体积比为55：10：35的甲醇：0.03mol/L HCl：水为流动相，采用等度洗脱。该鉴别方法，灵敏度高，分离度和重现性好，鉴别特征明显，能够准确鉴别蜂王浆制剂中掺0.5%以上的人工合成的10‑HDA。

技术领域

本发明属于检测分析技术领域，具体涉及一种鉴别蜂王浆制剂中10-HDA的方法。

背景技术

蜂王浆是工蜂头部的分泌物，色白或淡黄，是理想的天然保健品，其味酸辛、微甘，性平；既补先天之根本，又益后天之不足；具有宣肺益气、善疏肝理气、滋补强壮、提高免疫能力的功能。蜂王浆的成分极其复杂，其主要成分包括蛋白质、多种氨基酸、维生素、脂肪酸、生物活性酶等。对人体有明显的保健作用，特别是对心血管病、血脂代谢紊乱、高血压、内分泌失调等症有良好的调治作用。

蜂王浆含有26种以上的脂肪酸，目前已确认有12种，其中10-羟基-2-癸烯酸(简称10-HDA)，占总脂肪酸的50％以上，是蜂王浆的重要成分。10-HDA是由德国科学家D.J.朗格(1921)首次在工蜂上额腺中发现的，日本学者佐藤道夫也以大量数据证实。10-HDA主要分泌于工蜂的上颚腺，1957年Batendt首先报导从王浆中分离出10-HDA，至今还未在自然界其它物质中发现此化合物。由于在自然界中只有蜂王浆中才有，所以10-HDA通常又被称为王浆酸。

10-HDA有多种生理活性,它具有抗菌、灭菌、强壮机体和抑制淋巴癌、乳腺癌等多种癌细胞的作用，还有增强机体免疫功能，防治脱发，并用作化妆品的增效剂，还用作治疗急性辐射损伤和化学物质所致损伤。10-HDA常温时为白色晶体，性质稳定，在室温或高温下长时间存放时，结构不会被破坏或完全消失。该化合物的结构如下：

目前10-HDA主要由蜂王浆浆渣中提取，对于人工合成的10-HDA的研究仍处于起步阶段。10-HDA的含量是评判蜂王浆品质的重要指标，如果10-HDA的含量≥1.4％为合格品，含量≥1.8％为优等品。虽然所有的蜂王浆制剂中都含有10-HDA，但是由于10-HDA的来源不同，导致其含有的杂质种类不同。由于蜂王浆制剂的利润高，且目前对于10-HDA的检测标准较低，造成不法商人通过添加人工合成的10-HDA，制备出检测合格的蜂王浆制剂假货。由于10-HDA在人工合成过程中会引入一些未知的杂质，且对于这些杂质还没有相关的研究。这样可能会因为这些杂质而损害消费者的健康。这极大地危害到人民群众的食品安全，危险性极大。目前对10-HDA的相关研究较多，但都集中于蜂王浆制剂中10-HDA含量的检测，而对人工合成的10-HDA中杂质的研究没有相关报道。因此，一种简单、反应灵敏、快速的对蜂王浆制剂中10-HDA的掺假的检测方法对保证人民食品和保健品安全意义重大。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鉴别蜂王浆制剂中10-HDA的方法，该方法能去除绝大多数杂质的干扰，快速将蜂王浆制剂中10-HDA分离出来，并根据不同来源10-HDA的谱图，来鉴别蜂王浆制剂是否掺假。

人工合成的10-HDA与由蜂王浆浆渣提取的10-HDA所含的杂质不一样，人工合成的10-HDA中的杂质，在从蜂王浆浆渣中提取的10-HDA中没有出现过。本发明利用该区别来鉴别蜂王浆制剂中是否掺假。

为实现上述目的，本发明提供了一种鉴别蜂王浆制剂中10-HDA的方法，主要包括以下步骤：

步骤1：蜂王浆制剂的前处理：

由于蜂王浆制剂中的其它成分会影响10-HDA的测定，因此需要对蜂王浆制剂进行前处理；蜂王浆制剂的前处理主要包括以下步骤：

步骤1.1：将蜂王浆制剂溶解于乙醇，并上样于30～60目柱层析硅胶；