[发明专利]间皮素检测细胞质控片

说明书

本发明涉及一种间皮素免疫组化检测细胞质控片以及相关检测试剂，所述细胞质控片包括切片区；所述切片区粘附有石蜡切片，所述石蜡切片含有4种起对照作用的表达间皮素的阴性、弱阳性、阳性、强阳性细胞团；本发明涉及的免疫组化检测细胞质控片主要用于提高免疫组化检测结果的准确性和一致性，有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种间皮素免疫组化检测相关细胞或组织样品对照质控片以及相关检测试剂。

背景技术

间皮素(Mesothelin，MSLN)是一个膜蛋白，间皮素基因编码的是一个71KD的前蛋白，经修饰切割变成两段，40KD的糖基化磷脂酰肌醇细胞膜锚定蛋白和31KD的游离片段称为巨核细胞促进因子。有研究证实 40KD的膜锚定蛋白包含一段与另一个肿瘤标志物CA125蛋白的结合区，它们可能与细胞粘附有关，因而猜测可能会有助于原发癌发生远端转移(例如腹腔转移)，并导致预后较差。

虽然Mesothelin的功能尚不确切，但是无论是细胞膜结合区还是游离区都被证实可以作为间皮癌、胰腺癌、卵巢癌等多种肿瘤的标志物和治疗靶点。据报道胰腺癌(86％-100％)和卵巢非黏液性癌，其中浆液性癌 (93％-100％)、透明细胞癌(43％-75％)和移行细胞癌(100％)中存在MSLN阳性表达。大约40％到50％的肺腺癌和15％到30％的肺鳞状细胞癌也有报道存在MSLN阳性表达。准确的鉴别出患有大量表达 MSLN蛋白肿瘤的患者(即可能从MSLN靶向治疗中受益的患者)，对于指导患者的用药是有意义的。

免疫组化方法的主要原理是：应用免疫学基本原理—抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及相对定量的研究方式。

免疫组化技术的主要特点是：1特异性强：免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性；2敏感性高：抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合，这样高敏感性的抗体抗原反应，使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理分析工作。3定位准确：该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学研究的深入具有重要的意义。

由于免疫组化实验过程相对复杂，影响检测结果的因素较多，并且免疫组化结果的判读受判读者主观影响相对较大，因此，一般而言，需要标准化的对照装置，例如：细胞质控片。现有技术中的用于免疫组化实验的质控片并没有设置不同表达强度的对照细胞，因此，对照效果有待提高。

在实验过程中使用细胞质控片作用如下：

在免疫组化过程中对于细胞质控片染色是否正常可以作为免疫组化检测系统正常的依据，如果实验过程出现意外可以辅助寻找问题。

质控片可以用于抗体筛选，实验条件筛选等过程，节省购买医院病理切片的成本，相比病理组织，使用细胞质控片具有较高的一致性。

病理组织进行免疫组化检测后，组织会出现不同强度的染色，组织中肿瘤细胞染色强度的高低与染色所占的的百分比通常能够反映肿瘤组织中靶标抗原的表达量。细胞质控片中存在MSLN不同表达强度的细胞，免疫组化染色后能够显示不同的染色强度，在病理组织切片免疫组化结果判读时，细胞质控片可以作为染色强度的“比色卡”作用，辅助病理切片免疫组化结果的判读。提高对免疫组化实验结果判读的精密度，从而提高该靶标免疫组化检测结果的准确性。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于免疫组化法检测肿瘤靶标MSLN蛋白表达情况的质控切片，该质控切片的作用是能够提高MSLN靶标蛋白免疫组化检测结果的可信度和准确性。