[发明专利]一种溶解白念珠菌生物被膜胞外基质的方法

说明书

一种溶解白念珠菌生物被膜胞外基质的方法，向菌液中加入酶液，然后25℃反应1.5~2.5小时，反应完成后离心以将酶液弃去，然后加入鱼腥草素钠溶液，37℃反应20~28小时后加入XTT溶液，然后在避光条件下，于37℃反应1.5~2.5小时；所述菌液为生成有生物被膜的白念珠菌的菌液。鱼腥草素钠是中草药鱼腥草的加成提取物，本发明利用鱼腥草素钠与酶的协同作用，定向水解白念珠菌生物被膜胞外基质成分，从而有效提高抗菌效果。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种溶解白念珠菌生物被膜胞外基质的方法，特别涉及一种鱼腥草素钠与酶协同作用溶解白念珠菌生物被膜胞外基质的方法。

背景技术

白念珠菌是一种腐物寄生菌，平时生存于人体的皮肤、粘膜、消化道及其他脏器中，当机体抵抗力降低时，白色念珠菌就会繁殖，达到一定量时，人体就会发病，因而，白念珠菌是一种人类条件致病性真菌。

白念珠菌可以通过形成生物被膜提高自身的耐药性。白念珠菌生物被膜分泌的胞外基质成分非常复杂，总体来说含有蛋白质（占胞外基质干重55%）、多糖（占胞外基质干重25%）、脂质（占胞外基质干重15%）及核酸（占胞外基质干重5%）等大分子物质。

目前，传统抗真菌药物虽然品种相对有限，但靶点比较清楚，有利于药物的联合使用和新药的再开发利用。中药单体及其提取物是丰富的抗真菌宝库，但普遍存在着药物作用靶点不够明确的缺点。

发明内容

本发明目的在于提供一种溶解白念珠菌生物被膜胞外基质的方法。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种溶解白念珠菌生物被膜胞外基质的方法，向菌液中加入酶液，然后25℃反应1.5~2.5小时，反应完成后离心以将酶液弃去，然后加入鱼腥草素钠溶液，37℃反应20~28小时后加入XTT溶液，然后在避光条件下，于37℃反应1.5~2.5小时；所述菌液为生成有生物被膜的白念珠菌的菌液。

优选的技术方案为：所述酶液的浓度为50μg/mL。

优选的技术方案为：所述酶液的酶选自溶壁酶、核糖核酸酶A、脱氧核糖核酸酶I、蛋白酶XIV。

优选的技术方案为：所述鱼腥草素钠溶液的浓度为512~1024μg/mL。

优选的技术方案为：所述XTT溶液为将3,3'-[1-(苯氨酰基)-3,4-四氮唑]-二(4-甲氧基-6-硝基)苯磺酸钠溶解于林格氏液而得。

附图说明

附图1为不同浓度的SH在溶壁酶浓度50μg/mL对白念珠菌SC5314的OD492nm处的吸光度值。

附图2为不同浓度的SH在RNA酶浓度50μg/mL对白念珠菌SC5314的OD492nm处的吸光度值。

附图3为不同浓度的SH在DNA酶浓度50μg/mL对白念珠菌SC5314的OD492nm处的吸光度值。

附图4为不同浓度的SH在蛋白酶K浓度50μg/mL对白念珠菌SC5314的OD492nm处的吸光度值。

附图5为不同浓度的SH在蛋白酶XIV浓度50μg/mL对白念珠菌SC5314的OD492nm处的吸光度值。

附图6为不同浓度的SH在氨基己糖酶浓度50μg/mL对白念珠菌SC5314的OD492nm处的吸光度值。

附图7为不同浓度的SH在糖醛酸酶浓度50μg/mL对白念珠菌SC5314的OD492nm处的吸光度值。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：

鱼腥草素钠是中草药鱼腥草的加成提取物，本发明利用鱼腥草素钠与酶的协同作用，定向水解白念珠菌生物被膜胞外基质成分，从而有效提高抗菌效果。