[发明专利]一种高选择超灵敏过氧化亚硝酸盐比率荧光探针

说明书

本发明涉及一种高选择超灵敏过氧化亚硝酸盐比率荧光探针。具体地，本发明的探针为一种苯并噻唑‑罗丹明类化合物，其可作为过氧化亚硝酸盐比率荧光探针用于过氧化亚硝酸盐的检测。这类探针可实现如下的技术效果中的至少一个：高选择性地识别过氧化亚硝酸盐；可以快速对过氧化亚硝酸盐实现响应；可以实现对过氧化亚硝酸盐的超灵敏分析；可以实现对过氧化亚硝酸盐的比率定量分析；和性质稳定，可以长期保存使用。

技术领域

本发明涉及苯并噻唑-罗丹明类化合物作为过氧化亚硝酸盐比率荧光探针，能够对过氧化亚硝酸盐高选择超灵敏分析，或者其可测定样品中过氧化亚硝酸盐的浓度。

背景技术

活性氧和活性氮物质参与生命系统中多种生理过程，包括信号传导、炎症和抗氧化损伤。过氧化亚硝酸盐作为活性氧和活性氮中的一种强氧化性物质，它是由一氧化氮和超氧自由基反应产生的，具有高的反应活性和不稳定性，在生命系统中的信号传导和抑菌作用中起着重要作用。然而由于其对蛋白质、核酸、脂类等的硝化损伤，过氧化亚硝酸盐也被认为是有害的，细胞中过氧化亚硝酸盐的异常积累将导致许多疾病，包括缺血再灌注损伤、炎症性疾病、神经退行性疾病，甚至是癌症。由于缺乏检测生理水平的过氧化亚硝酸盐的可靠技术，因此过氧化亚硝酸盐的作用机制还没有被完全的阐明。因此，寻求一种特定和灵敏检测生命体中的过氧化亚硝酸盐的技术是至关重要的。

近年来，已报到道的检测过氧化亚硝酸盐的方法有分光光度比色法、高效液相色谱法、化学发光分析法、荧光探针分析法等，其中荧光探针因其高选择、超灵敏、合成简单等独特的优势而成为研究者关注的焦点。目前已报道的荧光探针分析方法仍存在一定的缺陷，例如灵敏度低、选择性差、水溶性差、合成复杂等。生命体内其他活性氧和活性氮与过氧化亚硝酸盐性质相似，它会对过氧化亚硝酸盐的检测构成潜在干扰，并且生理环境中的过氧化亚硝酸盐含量较低，因此，发展高选择性高灵敏荧光探针成为急需解决的课题。另外，比率型荧光探针可以消除环境因素的干扰，因此受到广泛关注。总之，发展高选择性的、高灵敏度、合成简单的、水溶性好的比率荧光探针是本领域技术人员急需解决的问题

发明内容

本领域急需制备一种简单的高选择超灵敏过氧化亚硝酸盐比率荧光探针，从而能够有效检测过氧化亚硝酸盐。为此，本发明合成了一类新颖的过氧化亚硝酸盐比率荧光探针，其合成简单、选择性好、灵敏度高、能够识别过氧化亚硝酸盐。具体而言，本发明提供了一种过氧化亚硝酸盐比率荧光探针，其为苯并噻唑-罗丹明类化合物，其结构如下：

优选的，本发明的荧光探针是：

本发明还提供了过氧化亚硝酸盐荧光探针的制备方法，其是通过将对应于本发明的探针的相应的苯并噻唑-罗丹明类化合物与水合肼在无水乙醇溶液中回流6小时而合成制得。

本发明还提供了用于检测样本中过氧化亚硝酸盐浓度的检测制剂，其包含本发明的探针。优选地，本发明的检测制剂还包含产品的使用说明书。还优选地，本发明的检测制剂还包含用于测定样本中的过氧化亚硝酸盐浓度的缓冲剂。

本发明还提供了检测样本中过氧化亚硝酸盐浓度的方法，其包括将本发明的探针与待测样本接触的步骤。

本发明还提供了本发明的探针在制备用于检测样本中过氧化亚硝酸盐浓度的制剂中的用途。

本发明的过氧化亚硝酸盐比率荧光探针可与过氧化亚硝酸盐进行作用，产生荧光光谱的变化，从而实现对过氧化亚硝酸盐的定量检测。

具体而言，本发明的过氧化亚硝酸盐比率荧光探针不与钾离子、钙离子、钠离子、镁离子、锌离子、三价铁离子、二价铁离子、硝酸根、亚硝酸根、氯离子、硫酸根、过氧化氢、超氧化钾等反应，从而实现对过氧化亚硝酸盐的选择性识别。

本发明的过氧化亚硝酸盐比率荧光探针与过氧化亚硝酸盐反应非常灵敏，从而有利于对过氧化亚硝酸盐的检测。