[发明专利]止痛化癥胶囊的HPLC指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种止痛化癥胶囊的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，包括下列步骤：

步骤1、止痛化癥胶囊供试品溶液的制备：

取十批不同批号的止痛化癥胶囊内容物各3.0g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入30ml甲醇溶液,超声提取45min，过滤，将滤液蒸干后，取残渣加入甲醇溶液，超声溶解，定容5ml，得供试品溶液；

步骤2、混和对照品溶液制备

精密称定：丹参素对照品0.0016g，原儿茶酸对照品0.0020mg，原儿茶醛对照品0.0032g, 迷迭香酸对照品0.0025g，党参炔苷对照品0.0011 mg，紫草酸对照品0.0013g,丹酚酸B对照品0.0019g，混合置于10 ml 量瓶中，加入甲醇溶解，并定容至刻度线，超声至溶解，摇匀，作为混合对照品备用液；

步骤3、分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，其中：液相色谱条件：色谱柱为UniSil^®5-120 C18 Ultra色谱柱，其规格为色谱柱内径为4.6mm，色谱柱长度250 mm，色谱柱填料颗粒直径5 μm，流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.05%的甲酸水溶液，进行梯度洗脱，程序为：0min～15min，流动相为5%A、95%B，15min～30min，5%A上升至10%A、95%B下降至90%B；30min～60min，10%A上升至20%A、90%B下降至80%B；60min～80min，20%A上升至30%A、80%B下降至70%B，80min～100min，30%A，70%B，流速：1.0mL/min，进样量：20μL，柱温：30 ℃，检测波长：280 nm；

步骤4、将步骤3中获得的止痛化癥胶囊供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择十批不同批号止痛化癥胶囊的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰， 用平均值计算法，生成止痛化癥胶囊的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，并根据对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。

2.根据权利要求1所述的一种止痛化癥胶囊的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：指纹图谱中选择32个共有峰作为止痛化癥胶囊指纹图谱的特征峰，以这些特征峰作为质量评价的变量指标，32个共有峰中丹参素为1号峰、保留时间11.561为分钟，原儿茶酸为2号峰、保留时间为14.534分钟，原儿茶醛为6号峰、保留时间为23.365分钟，迷迭香酸为23号峰、保留时间为68.808分钟，党参炔苷为24号峰、保留时间为69.455分钟，紫草酸为25号峰、保留时间为70.559，丹酚酸B为28号峰、保留时间为73.988分钟。