[发明专利]一种提高雨生红球藻生物量和虾青素含量的方法

说明书

本发明涉及一种提高雨生红球藻生物量和虾青素含量的方法，属于生物工程技术领域。本发明所述方法为：首先配制添加醋酸钠或醋酸镁的BBM培养基，进行灭菌后接种已培养至指数期的雨生红球藻至浓度为2.0×10⁵‑2.5×10⁵cells/mL，然后在温度24‑26℃，光强2000‑2500lx条件下培养，每隔一天取样测生物量；在生物量达到最大时收集藻细胞，用添加褪黑素的缺氮BBM培养基稀释至2.0×10⁵‑2.5×10⁵cells/mL，在温度26‑28℃，光强12000‑14000lx条件下培养，每隔一天取样测虾青素含量。本发明操作简单易行，并且可以一定程度上缩短雨生红球藻的生长周期并提高其生物量和虾青素含量。

技术领域

本发明涉及一种提高雨生红球藻生物量和虾青素含量的方法，属于生物工程技术领域。

背景技术

天然虾青素是迄今为止人类发现自然界中最强的抗氧化剂，其抗氧化活性远远超过现有的抗氧化剂，被誉为“超级氧化剂”。由于天然虾青素具有良好的生物活性和生物安全性，因此在食品、医药化妆品、保健品、软饮料加工及水产品、家禽和家畜(鸡、猪和牛)饲料添加剂等行业具有广阔的市场前景。

目前，虾青素的主要生产方法包括人工合成和生物获取两种方式。人工合成虾青素不仅价格昂贵，而且同天然虾青素在结构、功能、应用、稳定性、吸收效果和生物安全性等方面差别显著。而天然虾青素的生物来源最适宜大规模生产的利用雨生红球藻积累虾青素。雨生红球藻中虾青素含量高达1.0％～3.0％，因此被看作是天然虾青素的“浓缩品”和最佳生物来源。

虽然雨生红球藻是目前最好的虾青素工业生产来源，但它生长缓慢，培养过程中容易被其他生物污染，为了优化工业生产过程，提高虾青素的产量，需要为天然虾青素的生产提供优良培养方法，以提高工业产量。

目前，在国内已经有雨生红球藻生产虾青素的相关专利技术，如专利名为“一种培养雨生红球藻生产虾青素的建议方法”发明专利 ( CN ：CN581016140)，公开了控制调节培养温度、 pH 值、添加矿盐实现虾青素的积累；山东鸣惠生物科技股份有限公司“一种利用植物激素促进雨生红球藻生长及虾青素含量的方法”（ CN 107338194 A），公开了利用植物激素萘乙酸和乙烯利提高雨生红球藻中虾青素的产率；山东理工大学发明专利“利用油菜素内酯刺激雨生红球藻快速生产虾青素的方法”(CN ：101974599 B)，公开了利用无水乙醇溶解油菜素内酯，再将用二甲基亚砜配置好的油菜素内酯母液添加到雨生红球藻培养基中，提高虾青素含量。天津大学的“用酵母发酵残液培养藻类生产虾青素的方法”（CN1480524A），公开了一种利用酵母发酵残液生产虾青素的方法，是向酵母发酵残液中加入无机盐配成培养基，在特定的容器内培养雨生红球藻，经过分离提取虾青素。上述相关专利中雨生红球藻生物量和虾青素积累量虽然有所提高，但不是很显著或者技术工艺较为复杂，不易操作。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高雨生红球藻生物量和虾青素含量的方法，该方法操作简单，可以一定程度上缩短雨生红球藻的生长周期并提高其生物量和虾青素含量，具体包括以下步骤：

（1）培养基的制备及灭菌：配制氮充足的BBM培养基，并在其中加入醋酸钠或醋酸镁，对培养基进行高压湿热灭菌；醋酸钠的加入量为0.5~2g/L，醋酸镁的加入量为0.05~0.5g/L；

（2）藻液的制备：将培养到对数生长期后期的雨生红球藻种子液接种到步骤（1）中制备的培养基中进行培养，使藻浓度为2.0×10⁵-2.5×10⁵ cells/mL；每隔一天进行取样测其生物量；做培养基中雨生红球藻的生长曲线并将生物量最大时的雨生红球藻进行收集；