[发明专利]猪肉中磺胺类兽药残留基体标准物质的定值方法

说明书

本发明提供了猪肉中磺胺类兽药残留基体标准物质的定值方法，所述方法包括基体标准物质预处理的步骤；所述预处理包括：(1)提取：向基体标准物质中加入提取溶剂进行目标物的提取，得到的上清液过无水硫酸钠柱，得到提取物；(2)净化：将步骤(1)所述提取物经水浴旋转蒸发干燥，采用流动相定容溶解，采用液‑液分配净化法进行净化，过滤后得到预处理的基体标准物质；其中，所述无水硫酸钠柱提前采用乙腈浸润；所述流动相提前采用正己烷饱和。本发明的方法采用正己烷饱和的流动相进行定容磺胺类兽药残留基体标准物质的提取物，减少了液‑液分配时提取液中的磺胺类药物分配到有机相中，磺胺类药物的回收率在95.7％‑104.8％之间，相对标准偏差小于5％(n＝6)。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，涉及猪肉中磺胺类兽药残留基体标准物质的定值方法。

背景技术

磺胺类兽药是一类具有对氨基苯磺酰胺结构的抗菌药物的总称，具有抗菌谱系广、抗菌能力强、价格低廉等优点，被广泛应用于预防和治疗食源性动物的感染性疾病。然而，长期食用含有磺胺类兽药的动物源食品容易引起过敏反应，影响泌尿系统功能，发生结晶尿、血尿等症状，破坏机体正常菌群的生态平衡，造成细菌抗药性等不良后果。磺胺类兽药是除“瘦肉精”外，残留量最容易超标的兽药之一，目前，中国、国际食品法典委员会(CAC)、欧盟和美国已将磺胺类药物列为动物饲养过程中限制使用的药物，并限定动物源食品中磺胺类药物的最大残留限量(MRL)为0.1mg/kg。我国农业部也严格监控磺胺类兽药的残留量，自1999年实施国家兽药残留监控计划以来，始终将磺胺类兽药列为国家兽药残留监控指标之一。

磺胺类兽药残留基体标准物质一般通过养殖给药的方式获得，目标物(磺胺)和基体(猪肉)的结合形式与真实样品完全一致，不仅可以有效避免分析过程中基体对目标物的影响，而且可以在不同时间与空间内保证磺胺检测结果的一致性与可比性，是实现磺胺准确定量和溯源的物质基础。建立一种准确性高的磺胺定值方法在研制磺胺类兽药残留基体标准物质中具有重要意义。

液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)是目前磺胺检测的最主要的确证方法，但是由于猪肉中的脂肪含量和蛋白含量较高，前处理过程繁琐，显著影响了测定结果的可靠性和准确性。文献报道的LC-MS/MS的加标回收率一般为70％-110％，结果标准偏差一般为15％-30％，无法满足基体标准物质的定值要求(“超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中磺胺类药物残留量”，杨梅等，《食品安全质量检测学报》，第8卷，第3633-3638页，2017年)。

CN 101949898 A公开了一种动物源性食品中多种碱性药物残留量的检测方法，所述方法通过乙腈、异丙醇和柠檬酸缓冲溶液涡旋混合提取、亲水性聚苯乙烯-二乙烯基苯固相萃取柱和阳离子交换固相萃取柱净化及液相色谱-质谱测定来检测猪肉、猪肝、鸡蛋、虾、牛奶中多种碱性药物如β-受体激动剂类、磺胺类、苯二氮卓类、硝基咪唑类、苯并咪唑类、三苯甲烷类的残留量，然而该方法未去除提取溶剂中的水分，显著影响了药物的相对回收率和相对标准偏差，药物的相对回收率仅为63.1％-109.0％，相对标准偏差为1.6％-23.0％，无法满足基体标准物质的定值要求。

CN 102175784 A公开了固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定猪肉中54种药物残留的方法，所述方法通过乙腈提取，正己烷脱脂，再用C₁₈固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱法(LC-MS/MS)测定，同位素内标稀释内标法和外标法定量，回收率范围为21.1％-121％，相对标准偏差小于19.8％，可作为筛选方法应用于猪肉中磺胺类、硝基咪唑类、喹诺酮类、大环内酯类、林可酰胺类和吡喹酮共计54种药物残留的同时测定，然而该方法的回收率和相对标准偏差仍有待于进一步优化。

因此，提供一种准确性好、回收率高、相对标准偏差小的检测方法，用于磺胺类兽药残留基体标准物质的定值，在食品检验领域具有重要意义。

发明内容