[发明专利]一种检测氯胺酮的试纸条及其制备方法和应用方法

说明书

本发明公开了一种检测氯胺酮的试纸条及其制备方法和应用方法。该试纸条构成依次包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；结合物释放垫上喷涂有时间分辨荧光微球标记的抗体；所述的反应膜上包被有半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线和羊抗鼠二抗的质控线；本发明以时间分辨荧光微球标记抗体，采用免疫层析技术，实现氯胺酮的快速免疫分析。本发明还提供一种应用方法上述试纸条检测样品中氯胺酮的方法。本发明的优点是灵敏度高，可准确定量，检测快速、操作方便，经济实用，能够实现对大批量的氯胺酮样品进行快速检测和现场检测。

技术领域

本发明涉及氯胺酮的检测，具体是一种利用时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测氯胺酮的试纸条及其制备方法和应用方法。

背景技术

氯胺酮，一种分离性麻醉剂，是苯环已哌啶（PCP）的衍生物，俗称“K粉”，在临床上一般作为麻醉剂使用。氯胺酮能兴奋血管，吸食过量可致死，具有一定的精神依赖性。“K粉”成瘾后，在毒品作用下，吸食者会疯狂摇头，很容易摇断脊椎；同时，疯狂的摇摆还会造成心力、呼吸衰竭。吸食过量或长期吸食，可对心、肺、神经都造成致命损伤，对中枢神经的损伤比冰毒还厉害。

目前针对氯胺酮的检测和监控方法主要包括高效液相色谱、气相色谱、液质或气质连用等。这些色谱方法具有很好的灵敏度和特异性，但操作复杂，通量不高，耗时较长，仪器设备昂贵。酶联免疫吸附测定(ELISA)以及胶体金免疫层析法是目前国际公认的主流技术，这两种方法具有检测速度快，价格便宜，操作简单等优点。但ELISA检测仍需专业人员，且需要较长时间显示结果；胶体金法能对氯胺酮进行定性分析，操作简单，检测时间较短，但灵敏度低、人为因素干扰较大。

综上所述，目前氯胺酮的检测技术尚不成熟，开发一种灵敏度高、操作简便并且能够实现对大批量样品进行快速检测的产品和方法成为迫切需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有的检测氯胺酮的方法存在的操作复杂、耗时较长，并且不能够实现对大批量样品的快速检测的特点，提供一种操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低的检测氯胺酮的试纸条及其制备方法和应用方法，以实现对大批量的氯胺酮样品进行快速检测和现场监控。

为了实现本发明的目的，本发明的一种检测氯胺酮的试纸条采用以下技术方案：一种检测氯胺酮的试纸条，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；其特征在于：所述的结合物释放垫上喷涂有时间分辨荧光微球标记的抗体；所述反应膜上包被有半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和羊抗鼠二抗的质控线。

所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫均粘贴在底板上且中任意相邻两个沿上下方向部分叠加，结合物释放垫的1/3-1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述时间分辨荧光微球是直径为100 nm-500 nm的稀土离子作为标记物的荧光微球，其表面修饰有功能基团，用于蛋白、抗体和核酸的共价偶联。

所述时间分辨荧光微球的激发波长为300-400 nm，发射波长为500-700 nm。

所述样品吸收垫为玻璃纤维素膜。

所述结合物释放垫为玻璃纤维或聚酯材料。

所述反应膜为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

所述底板为PVC底板或其他硬质不吸水的材料。

所述吸水垫为吸水纸。

本发明的一种制备上述检测氯胺酮的试纸条的方法，包括以下步骤：

1）用荧光微球标记氯胺酮抗体，并将其喷涂在结合物释放垫上，以制备喷涂有氯胺酮单克隆抗体-荧光微球标记物的结合物释放垫；

2）将半抗原-载体蛋白偶联物和羊抗鼠二抗分别喷涂于反应膜上作为检测线（T）和质控线（C）；