[发明专利]一种基于荧光内滤效应检测脂肪酶活的荧光分析方法

权利要求书

1.一种基于荧光内滤效应检测脂肪酶活的荧光分析方法，其特征在于，硫化镉量子点和巯基乙酸甲酯修饰的纳米金混合以后，由于荧光内滤效应，硫化镉量子点的荧光发射强度明显降低，加入脂肪酶后，脂肪酶能水解切割巯基乙酸甲酯修饰的纳米金表面的巯基乙酸甲酯生成巯基乙酸，在弱酸性条件下，巯基乙酸和柠檬酸会部分质子化，水解生成的巯基乙酸和纳米金表面的柠檬酸形成氢键，形成的氢键会诱使纳米金聚集，荧光内滤效应减弱，导致硫化镉量子点荧光恢复，脂肪酶活性与荧光放射强度变化存在着一定的关系，因此可以利用荧光信号传感器检测脂肪酶的活性。

2.根据权利要求1所述的检测脂肪酶活的荧光分析法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)制得巯基乙酸甲酯修饰的纳米金和硫化镉量子点；

(2)将巯基乙酸甲酯修饰的纳米金和硫化镉量子点混合，采用PBS缓冲溶液调节溶液的pH值；

(3)向步骤(3)中调节好pH的反应液中加入一定浓度的脂肪酶，调节反应温度和反应时间；

(4)脂肪酶酶活检测标准曲线：在最优pH、反应温度和反应时间条件下，加入不同浓度的脂肪酶，测定其荧光强度。以硫化镉量子点荧光强度恢复值作为纵坐标，脂肪酶的浓度作为横坐标，绘制标准曲线。

3.根据权利要求1所述的检测脂肪酶活的荧光分析方法，其特征在于，所述步骤(1)中，量子点表面的巯基乙酸甲酯浓度为4μM。

4.根据权利要求1所述的检测脂肪酶活的荧光分析方法，其特征在于，所述步骤(2)中PBS缓冲溶液调节溶液的最优pH为6.0。

5.根据权利要求1所述的检测脂肪酶活的荧光分析方法，其特征在于，所述步骤(3)中最优的反应温度为45℃，反应时间为14min。