[发明专利]一种基于柱前衍生结合高效液相色谱-荧光法的水中草铵膦的测定方法

说明书

本发明公开了一种基于柱前衍生结合高效液相色谱‑荧光法的水中草铵膦的测定方法，包括以下步骤：移取草铵膦溶液于棕色玻璃样品瓶中，依次加入四硼酸钠水溶液和氯甲酸‑9‑芴基甲酯丙酮溶液，盖紧瓶盖，涡旋30s，在水浴下反应；反应完成后，将全部液体转移至刻度管中，加入分析纯二氯甲烷，振荡，室温下静置后取上层水样过0.22μm滤膜；进高效液相色谱检测。本发明可避免高浓度的衍生化试剂水解产物对离子源的污染，为水中草铵膦的检测提供了一个简便、快速、准确的方法。

技术领域

本发明属于草铵膦的检测技术领域，具体地说，涉及一种基于柱前衍生结合高效液相色谱-荧光法的水中草铵膦的测定方法。

背景技术

草铵膦是一种膦酸类、广谱、非选择性、触杀性和非残留性除草剂。与草甘膦相比，草铵膦更能有效去除多年生恶性杂草。尽管草铵膦属于非持久性农药，但其大量使用仍造成了严重的环境污染。大量研究表明，低剂量草铵膦会影响初生动物脑部发育，动物食用过量草铵膦会导致发抖、抽搐、呼吸困难等中毒症状。同时，草铵膦的不合理使用还会对水体造成污染，尤其对饮用水以及饮用水源的污染将会对人体健康产生重大威胁。因此，很有必要建立一种简便、快速的草铵膦检测方法。

草铵膦在结构中含有膦酸基、氨基、羟基，是极强的两性化合物。使用气相色谱和气相色谱-质谱联用技术进行草铵膦检测时，需要将其转化成可气化的物质，该操作会引入过多的其他试剂，且操作过程繁琐，检测效率和灵敏度都相对较低。草铵膦紫外吸收弱，且很难在常规的C18柱子长保留，所以使用液相色谱-紫外测定时灵敏度较低。使用液相色谱-质谱直接测定草铵膦时，仪器响应较低，且需要离子交换柱等特殊柱子进行分离。所以，目前文献报道中常采用氯甲酸-9-芴基甲酯对草铵膦进行柱前衍生，再结合液相色谱质谱法和液相色谱-荧光法进行草铵膦检测。虽然固相萃取小柱可以去除反应体系中的硼酸钠盐和部分杂质，但仍不能完全去除衍生化试剂水解产物和一些影响草铵膦定量的干扰杂质。另外，衍生化试剂水解产物浓度高，进入质谱会造成离子源的污染，影响质谱的稳定性，干扰草铵膦的准确定量。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种基于柱前衍生结合高效液相色谱-荧光法的水中草铵膦的测定方法，本发明在WatersT₃色谱柱上对草铵膦衍生化产物进行分离，在不使用固相萃取小柱的前提条件下，排除了杂质对草铵膦定量的干扰，为水中草铵膦的检测提供了一个简便、快速、准确的方法。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种基于柱前衍生结合高效液相色谱-荧光法的水中草铵膦的测定方法，包括以下步骤：

步骤1、衍生化反应：移取草铵膦溶液于棕色玻璃样品瓶中，依次加入四硼酸钠水溶液和氯甲酸-9-芴基甲酯丙酮溶液，盖紧瓶盖，涡旋30s，在水浴下反应；

步骤2、预处理：反应完成后，将全部液体转移至刻度管中，加入分析纯二氯甲烷，振荡，室温下静置后取上层水样过0.22μm滤膜；

步骤3、进高效液相色谱检测。

可选地，所述的四硼酸钠缓冲溶液通过以下方法制备得到：称取3.80g四硼酸酸钠，用饮用纯净水定容至100.0mL，得到浓度为0.100mol/L的四硼酸钠水溶液。

可选地，所述的氯甲酸-9-芴基甲酯丙酮溶液通过以下方法制备得到：称取0.10g氯甲酸-9-芴基甲酯，用分析纯丙酮定容至100.0mL，得到浓度为1.0mg/mL的氯甲酸-9-芴基甲酯丙酮溶液。

可选地，所述的待测水样、四硼酸钠水溶液和氯甲酸-9-芴基甲酯丙酮溶液的体积比为：0.5-2:0.5-2：0.5-1.5。

可选地，水浴温度为35-45℃，水浴时间为30-120min。

可选地，分析纯二氯甲烷与草铵膦溶液的体积比为4:0.5-4:2；振荡时间为0.5-1.5min；静置时间为8-12min。