[发明专利]一种羊的γ干扰素突变体及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种羊的γ干扰素与羊γ干扰素突变体以及含有上述羊γ干扰素或羊γ干扰素突变体的重组载体或重组宿主细胞，所述羊γ干扰素或羊γ干扰素突变体可以用于制备预防或治疗羊病毒性疾病的药物或试剂中。本发明利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达所述羊的γ干扰素突变体，抗病毒活性大幅度提高，本发明方法工艺简单，可快速获得大量安全可靠的羊的γ干扰素,对畜牧业的发展具有重大意义。

技术领域

本发明属于兽用医药领域，具体涉及一种羊的γ干扰素突变体及其制备方法与应用。

背景技术

干扰素是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质，其活性的发挥又受细胞基因组的调节和控制，涉及RNA和蛋白质的合成。IFN蛋白家族根据其编码基因的序列、染色体定位和受体特异性分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素。Ⅰ型干扰素包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-δ、IFN-ε、IFN-ζ、IFN-τ等，哺乳动物中主要是IFN-α和IFN-β。Ⅰ型干扰素具有较强的抗病毒活性，主要通过干扰病毒的复制抑制其增殖，还具有抗肿瘤和免疫调节的功能。Ⅱ型干扰素只有IFN-γ一个成员，又称为免疫干扰素，主要作用是激活巨噬细胞杀灭微生物。Ⅲ型干扰素是新发现的细胞因子，包括λ1(IL-29)、λ2(IL-28a)和λ3(IL-28b)。Ⅲ型干扰素与Ⅰ型干扰素关系密切，但有特殊的生理学功能，如刺激主要组织相容性复合体(major histocom-patibility complex，MHC)分子的活化和表达，调节先天免疫和获得性免疫等。由于干扰素具有广谱抗病毒、抗肿瘤的活性以及强大的免疫调节作用，现已成为病毒学、细胞学、分子生物学、临床医学、免疫学、肿瘤学等相关领域的研究热点之一。

Ⅱ型干扰素的成员IFN-γ，主要由活化的NK、NKT细胞及T细胞表达，IFN-γ的受体是IFNGR，属于异二聚体，广泛表达于多种细胞。是重要的免疫应答分子，参与免疫应答的整个过程，调控免疫应答的走向，尤其对细胞免疫有重要的作用。

羊的IFN-γ主要通过三条途径起作用，第一通过上调MHC-Ⅰ类抗原的提呈途径增加细胞毒性T淋巴细胞对病原体的敏感性，使CTL更有效地将病原体清除；第二使免疫反应向Th1表型转化，使静止的CD4+T细胞分化为Th1细胞，同时抑制Th2细胞的增殖；对免疫细胞进行调节来实现免疫调节功能的。第三IFN-γ还可以通过与细胞表面受体的结合，诱导病毒感染细胞产生多种抗病毒蛋白，使细胞内产生抗病毒状态而发挥抗病毒作用或者干扰细胞周期，抑制细胞增殖，抑制病毒性疾病的治疗。

羊是常见的饲养动物，抗逆能力强、肉质好、性成熟早及繁殖能力强等优点。是适合家庭养殖的重要牲畜之一。为人类提供毛皮和肉，其毛皮是多种毛织品和皮革制品的原料。羊肉是冬令绝佳的食疗保健品。羊肉含有丰富的蛋白质、脂肪、维生素B、尼克酸、无机物钙、磷、铁、钾、碘等成分,营养十分全面,丰富。另外，也有较高的药用价值，但是羊养殖业仍然受到了一些病毒性疾病的侵扰，但是缺少安全可靠且价格合理的羊γ干扰素类药物治疗或预防羊病毒性疾病。

发明内容

本发明所涉及到的术语定义

除非另外定义，否则本文所用的所有技术及科学术语都具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所了解相同的含义。