[发明专利]一种可用于层析分离填料的高强度多糖类凝胶微球

权利要求书

1.一种可用于层析分离填料的高强度多糖类凝胶微球，其特征在于：所述凝胶微球具有半刚性的骨架结构，最大流速为2500cm/h；

所述多糖优选天然多糖，进一步优选琼脂糖、葡聚糖或魔芋葡甘聚糖中的任意一种，更进一步优选琼脂糖。

2.根据权利要求1所述的一种可用于层析分离填料的高强度多糖类凝胶微球，其特征在于：所述的凝胶微球的制备方法，包括以下步骤，

（1）多糖原料的修饰：配制多糖溶液，并加入双功能交联剂，在碱性条件下，其一端的活性基团与多糖链上的羟基反应，然后调节pH至中性，终止反应，加入保护剂和聚乙二醇，亲水性的多糖链沉淀析出，将离心得到的沉淀干燥，得到修饰的多糖原料；

（2）共混制备双功能交联剂修饰的多糖微球：将步骤（1）得到的修饰的多糖原料和未修饰的多糖原料混合溶于水，得到共混多糖溶液，将其分散在溶解有乳化剂的油相中，乳化，固化得到双功能交联剂修饰的多糖微球；

（3）双功能交联剂修饰的多糖微球的活化和交联：将步骤（2）得到的双功能交联剂修饰的多糖微球溶于水中，加入活化剂活化双功能交联剂的惰性基团，然后调节pH至碱性条件，双功能交联剂的惰性基团和多糖链上的羟基反应，得到高强度多糖类凝胶微球。

3.根据权利要求2所述的一种可用于层析分离填料的高强度多糖类凝胶微球，其特征在于：步骤（1）中的保护剂为缓冲物质、盐类和小分子糖类物质，其浓度为多糖的重量百分比的0-12%。

4.根据权利要求2所述的一种可用于层析分离填料的高强度多糖类凝胶微球，其特征在于：步骤（3）后任选进行：

（4）采用交联剂对步骤（3）得到的多糖类凝胶微球继续交联至少一次，优选一次或两次。

5.根据权利要求2所述的一种可用于层析分离填料的高强度多糖类凝胶微球，其特征在于：步骤（1）中多糖溶液的浓度为0.1-20%（w/v），优选1-20%（w/v），进一步优选2-15%（w/v）；

优选地，所述双功能交联剂至少含有一个活性基团和一个惰性基团，所述活性基团可以直接和多糖链上羟基反应，所述惰性基团经活化后可以和多糖链上羟基反应，进一步优选所述双功能交联剂选自烯丙基缩水甘油醚、烯丙基溴、甲基丙烯酸缩水甘油醚、4-乙烯基环氧环己烷或肉桂酰氯中的任意一种，更进一步优选为烯丙基缩水甘油醚或烯丙基溴；

优选地，所述双功能交联剂的体积占多糖溶液体积的1-50%，优选5-25%，进一步优选10-20%；

优选地，步骤（1）所述碱性条件下，OH-的浓度为0.05-5mol/L，优选0.2-2mol/L，进一步优选1mol/L；

优选地，步骤（1）所述反应的温度为40-100℃，优选50-90℃，进一步优选55-80℃；

优选地，步骤（1）所述反应的时间为0.5-10h，优选1-9h，进一步优选2-8h。

6.根据权利要求2所述的一种可用于层析分离填料的高强度多糖类凝胶微球，其特征在于：通过加入冰醋酸调节pH至中性，优选60%冰醋酸；

优选地，步骤（1）所述干燥选自真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥中的任意一种，优选冷冻干燥；

优选地，所述冷冻干燥的方法为：将沉淀在-70℃下预冻2小时，然后在真空状态下干燥至少24小时；

优选地，步骤（2）修饰的多糖原料质量占共混多糖总质量的10-95wt%，优选40-90wt%，进一步优选50-80wt%；

优选地，步骤（2）所述共混多糖溶液的浓度为0.1-20%（w/v），优选1-15%（w/v），进一步优选2-10%（w/v）；

优选地，步骤（2）所述乳化剂优选油溶性乳化剂，进一步优选自Span80，Arlacel83，PO-500或PO-310中的一种或者至少两种的混合物；

优选地，所述乳化剂的浓度为1-10%（w/v），优选1-8%（w/v），进一步优选2-6%（w/v）。