[发明专利]一种测定功能微生物载体发酵能力的方法

说明书

本发明公开了一种测定功能微生物载体发酵能力的方法，包括以下步骤：(1)将功能菌种接种于有机肥载体中，发酵得功能型生物有机肥备用；(2)测定功能菌种和功能型生物有机肥的特征性碳氮源，以功能菌种能够代谢的碳氮源面积为参照，标记为红色，以功能型生物有机肥能够代谢的碳氮源面积为检测，标记为绿色，取功能菌种与功能型生物有机肥代谢能力相同的碳氮源面积，标记为黄色；(3)计算有机肥载体的发酵能力；本发明通过比较功能微生物特征性碳氮源与发酵后生物有机肥特征性碳氮源二者间的差异性，可快速确定功能微生物载体的发酵能力，进而可快速确定功能微生物发酵的最佳载体，极大的提高了功能型微生物发酵载体的筛选效率。

技术领域

本发明涉及功能微生物，尤其涉及一种测定功能微生物载体发酵能力的方法。

背景技术

目前我国土壤面临的主要问题是：土壤养分转化慢、土壤污染物积累和土传病害频发。有机肥特别是具有特殊功能性的生物有机肥的施用成为修复烟田土壤、防治各种土传病害和连作障碍的新思路。但功能菌种单独施入土壤中不易定殖，将其接种于适合的有机肥中进行二次固体发酵以制成功能型生物有机肥，能够提高功能菌种在土壤和根际的定殖能力，从而达到调节土壤微生态，改善土壤微生物多样性、抑制病原菌的生长或提高植物自体抗性的目的。

然而，在众多的有机肥种类面前，为特定的功能微生物菌株选择一种适宜的有机肥进行最大限度扩繁，是此类研究的重点和难点。传统方法通常选择几种有机肥，将特定功能微生物接种一段时间后通过检测功能微生物的定殖情况来确定哪种有机肥较适合功能微生物的繁殖。但是，这种手段供试有机肥种类有限，且发酵前后也无法准确检测功能微生物数量变化，因此在应用上受到很大制约。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种测定功能微生物载体发酵能力的方法，通过比较功能菌种特征性碳氮源与发酵后生物有机肥特征性碳氮源二者间的差异性，可快速确定功能微生物载体的发酵能力，以解决传统接种方法存在的供试有机肥种类有限，以及无法准确检测功能微生物数量变化等问题。

本发明的技术方案是：一种测定功能微生物载体发酵能力的方法，包括以下步骤：

(1)将功能菌种接种于有机肥载体中，发酵得功能型生物有机肥备用；

(2)测定功能菌种和功能型生物有机肥的特征性碳氮源，以功能菌种能够代谢的碳氮源面积为参照，标记为红色，以功能型生物有机肥能够代谢的碳氮源面积为检测，标记为绿色，取功能菌种与功能型生物有机肥代谢能力相同的碳氮源面积，标记为黄色；

(3)利用以下公式计算有机肥载体的发酵能力，即

其中，Ay_i为功能菌种与功能型生物有机肥代谢能力相同的区域，即黄色面积，Ar_i为功能菌种能够代谢的碳氮源面积，即红色面积，i为在测定特征性碳氮源实验中除去对照孔的其余测定孔，n＝检测孔个数。

当功能菌种为革兰氏阳性菌时，功能菌种及其功能型生物有机肥测定碳源面积的方法如下：在PM板各孔中，分别加入按20ml IF-0a GN/GP、0.24ml染色剂F、2ml PM添加剂和1.76ml菌液配制的接种液，然后在对照孔和测定孔中添加各类含碳化合物，以功能菌种的表型特征为参照，标记为红色，以功能型生物有机肥表型特征为检测，标记为绿色，扫描计算对照孔中的红色面积即为功能菌种能够代谢的碳源面积，扫描计算测定孔中的绿色面积即为功能型生物有机肥能够代谢的碳源面积。