[发明专利]一种牛乳中乳过氧化物酶的快速检测方法在审
| 申请号: | 201810488501.7 | 申请日: | 2018-05-21 |
| 公开(公告)号: | CN110514654A | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
| 发明(设计)人: | 王加启;郑楠;张养东;李松励;赵圣国 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
| 代理公司: | 11535 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 刘元霞<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址: | 100193 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 乳过氧化物酶 标准比色卡 热处理 标准对照 大型仪器 过氧化氢 检测操作 检测分析 检测技术 快速检测 酶促反应 显色颜色 标准品 标准样 碘化钾 前处理 淀粉 分解 | ||
1.一种快速定性或半定量检测乳中过氧化物酶活性的方法,其特征在于,包括以下步骤:取待检测液态乳,加入淀粉、碘化钾和过氧化氢,摇匀反应;
优选,所述淀粉以溶液形式加入,所述淀粉溶液的浓度为0.5-1.5%,优选0.8-1.2%,最优选为1%;
优选,所述碘化钾以溶液形式加入,所述碘化钾溶液的浓度为5-15%,优选8-12%,最优选为10%;
优选,所述过氧化氢以溶液形式加入,所述过氧化氢溶液的浓度为0.25-0.75%,优选0.4-0.6%,最优选为0.5%;
优选,液态乳:淀粉溶液:碘化钾溶液:过氧化氢溶液的体积比为:1:(0.05-0.17):(0.01-0.04):(0.01-0.09),更优选为1:(0.08-0.14):(0.016-0.03):(0.03-0.07),最优选为:1:0.11:0.02:0.05。
2.一种快速检测液态乳乳品热加工处理情况的方法,其特征在于,包括以下步骤:取待检测液态乳,加入淀粉、碘化钾和过氧化氢,摇匀反应;
优选,所述淀粉以溶液形式加入,所述淀粉溶液的浓度为0.5-1.5%,优选0.8-1.2%,最优选为1%;
优选,所述碘化钾以溶液形式加入,所述碘化钾溶液的浓度为5-15%,优选8-12%,最优选为10%;
优选,所述过氧化氢以溶液形式加入,所述过氧化氢溶液的浓度为0.25-0.75%,优选0.4-0.6%,最优选为0.5%;
优选,液态乳:淀粉溶液:碘化钾溶液:过氧化氢溶液的体积比为:1:(0.05-0.17):(0.01-0.04):(0.01-0.09),更优选为1:(0.08-0.14):(0.016-0.03):(0.03-0.07),最优选为:1:0.11:0.02:0.05。
3.如权利要求1-2任一项所述的方法,其特征在于,进一步包括将待测样品的显色结果与标准比色卡和/或标准对照表格对比的步骤;所述标准比色卡上具有多个色块,色块的颜色与乳中LPO活性高低对应,指示了乳品中加入淀粉、碘化钾和过氧化氢后5分钟内显色的颜色深浅与LPO活性高低之间的关系,或者所述标准比色卡上具有多个色块,色块的颜色与乳品加热程度对应,指示了乳品中加入淀粉、碘化钾和过氧化氢后5分钟内显色的颜色深浅与乳品热处理程度之间的关系;所述标准对照表格指示了乳品加入淀粉、碘化钾和过氧化氢后显色反应的特点与乳品热处理情况之间的关系;
优选,所述标准比色卡由指示乳品中LPO浓度活性为0、700、1400、2100、3000、3800U/L的六个色块组成;
优选,所述标准比色卡由指示生乳、生乳经72℃加热15s、生乳经75℃加热15s、生乳经80℃或以上温度加热15s的相应色块组成;
优选,所述标准对照表格由指示生乳、生乳经72℃加热15s、生乳经75℃加热15s、生乳经80℃或以上温度加热15s的相应显色特点组成。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述指示LPO活性高低的标准比色卡的制备方法包括如下步骤:采用不含LPO或LPO已完全失活的液态乳,加入不同浓度活性的LPO标准品,形成含有不同浓度活性的LPO标准品的乳样,向该系列乳样中加入淀粉、碘化钾和过氧化氢后显色,将每个样品显色反应5分钟之内形成的颜色固定为比色卡的色块,并标注对应色块的LPO浓度活性;
优选,所述含有不同浓度活性的LPO标准品的乳样中LPO浓度活性以梯度递增;
优选,所述梯度递增是以倍数递增;
优选,以乳样中含有300-400U/L的LPO标准品浓度活性为浓度梯度的起点,以该起点的1倍的浓度倍数递增;或者以乳样中含有600-700U/L的LPO标准品浓度活性为浓度梯度的起点,以该起点的1倍的浓度倍数递增;
优选;所述含有不同浓度活性的LPO标准品的乳样中LPO浓度活性梯度包含一个2000-2200U/L的浓度、以及至少一个高于2000-2200U/L的浓度和至少一个低于2000-2200U/L的浓度。
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