[发明专利]一种靶向作用Syntenin蛋白的多肽及其二聚体和应用

说明书

本发明公开了一种靶向作用Syntenin蛋白的多肽及其二聚体和应用，属于生物医药技术领域。所述多肽的氨基酸序列为Cys‑Asp‑Lys‑Glu‑Φ‑Φ‑Val，其中Φ为3‑(2‑萘基)‑L‑丙氨酸。本发明提供的多肽是对筛选到的天然多肽配体进行氨基酸优化得到，显著提高了其与Syntenin蛋白串联PDZ结构域的亲和力。将上述多肽进行二聚化得到的二聚体多肽，与串联PDZ结构域的亲和力高达210nM，在10uM浓度下即能有效抑制Syntenin高表达的多种癌细胞的迁移、增殖、侵袭，同时不产生其他毒副作用，为治疗Syntenin高表达的恶性肿瘤转移侵袭的药物开发提供设计思路。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种靶向作用Syntenin蛋白的多肽及其二聚体和应用。

背景技术

多配体蛋白聚糖结合蛋白Syntenin是在原核生物及真核生物中广泛存在的一类胞内衔接蛋白(adaptor proteins)。研究发现Syntenin蛋白在多种高侵袭性恶性肿瘤中高度表达，并且其表达随肿瘤转移的进展而上调。

Syntenin由N端结构域(N-terminal domain,NTD)、两个串联的PDZ结构域(postsynaptic density protein,disc large and zonula occludens,PDZ)和C端结构域(C-terminal domain,CTD)组成。Syntenin蛋白的PDZ结构域可与不同膜受体C端的PDZ结合基序(PDZ binding motif,PBM)特异性结合，PDZ结构域结合受体的多样性导致了syntenin功能的多样性。

在肿瘤细胞发生发展过程中，PDZ结构域与一系列配体结合并相互作用，激活下游ERK1/2MAPK信号通路的磷酸化，进而发生一系列信号传导，最终上调基质金属蛋白酶MMP-2的活性，降解细胞外基质，促进肿瘤细胞迁移进入周围的间质中。

申请号为200580028969.9的专利文献公开了一种可有效抑制PDZ结构域相互作用的小分子，该化合物在超表达DvI的癌细胞中产生编程性细胞死亡。

基于Syntenin蛋白是一个有潜力的抑制肿瘤侵袭的药物靶点，Kegelman等开发了一种与syntenin非共价结合的小分子抑制剂类化合物，在抑制胶质母细胞瘤侵袭上发挥了良好的效果(Kegelman,T.P.et a1.Inhibition of radiation-induced glioblastomainvasion by genetic and pharmacological targeting of MDA-9/Syntenin.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United Statesof America 2017,114,(2),370-375.)。但是由于Syntenin蛋白串联PDZ结构域含有一个较大的疏水口袋结构，小分子化合物由于分子大小的局限性，与蛋白的亲和力较低，只有20uM，因此实验中分子浓度高达50uM，否则便难以发挥抑制效果，同时小分子药物本身存在代谢快、毒性大等不利因素。

在自然状态下，PDZ结构域的疏水口袋会与其相互作用蛋白的C端多肽结合，进而形成复杂的蛋白复合物并发挥功能。随着PDZ结构域在多种蛋白-蛋白相互作用中的深入研究，提供一种与PDZ结构域具有高亲和力的抑制剂，进而达到抑制Syntenin高表达的恶性肿瘤转移侵袭的目的，是本领域技术人员需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种靶向作用Syntenin蛋白的具有高亲和力的抑制剂，通过结合Syntenin蛋白中串联PDZ结构域来达到抑制癌细胞迁移、增殖、侵袭的目的，以解决小分子抑制剂亲和力不高，有效作用浓度高的缺点。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：