[发明专利]新重组因子C、其制造方法、及内毒素的测定法在审
| 申请号： | 201810483329.6 | 申请日： | 2013-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN108642030A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 水村光;小田俊男;川畑俊一郞 | 申请（专利权）人： | 生化学工业株式会社 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64;G01N33/569;G01N33/579 |
| 代理公司： | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人： | 刘新宇;李茂家 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 内毒素 测定法 制造 哺乳类细胞 宿主细胞 | ||
1.一种用于将耐盐离子性赋予鲎的因子C的方法，所述方法包括：
在作为宿主细胞的人的细胞或中国仓鼠的细胞中重组表达所述鲎的因子C，
其中所述因子C，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，具有较多的(α-2,3)键的末端唾液酸。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述盐离子选自由钠离子、钾离子、钙离子、和镁离子组成的组。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述因子C，在21mM的柠檬酸钠的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述因子C，在52mM的碳酸氢钠的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述因子C，在214mM的氯化钠的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述因子C，在16mM的硫酸镁的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述鲎的因子C为下述(A)、
(B)、(C)、或(D)所示的蛋白质：
(A)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；
(B)包含相对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列同源性或同一性、且具有因子C的活性的氨基酸序列的蛋白质；
(C)包含序列号4所示的氨基酸序列的蛋白质；
(D)包含相对于序列号4的氨基酸序列具有90％以上的序列同源性或同一性、且具有因子C的活性的氨基酸序列的蛋白质。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述鲎选自由东方鲎、美洲鲎、和圆尾鲎组成的组。
9.一种用于在盐离子的存在下的内毒素测定的水溶性鲎的因子C的制造方法，所述方法包括：
在作为宿主细胞的人的细胞或中国仓鼠的细胞中重组表达所述鲎的因子C，
其中所述因子C，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，具有较多的(α-2,3)键的末端唾液酸。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述方法包括：
回收作为溶液的表达的鲎的因子C。
11.根据权利要求9所述的方法，其中所述盐离子选自由钠离子、钾离子、钙离子、和镁离子组成的组。
12.根据权利要求9所述的方法，其中所述因子C，在21mM的柠檬酸钠的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
13.根据权利要求9所述的方法，其中所述因子C，在52mM的碳酸氢钠的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
14.根据权利要求9所述的方法，其中所述因子C，在214mM的氯化钠的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
15.根据权利要求9所述的方法，其中所述因子C，在16mM的硫酸镁的存在下，与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，显示出较高的残留活性。
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