[发明专利]与VISTA具有亲和力的短肽及其用途

说明书

本发明通过构建ELISA法筛选模型，提供了与VISTA具有亲和力的短肽及其用途，所述短肽与所述VISTA的结合率均大于15％，所述短肽在开发VISTA靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物中的应用，为特异性VISTA靶点抑制剂的药物开发提供实验依据，为VISTA靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物的开发奠定基础。

技术领域

本发明涉及化学生物学技术领域，特别是涉及与VISTA具有亲和力的短肽及其用途。

背景技术

T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(V-domain immunoglobulinsuppressorofT-cell activation，VISTA)是可抑制T细胞免疫应答的负向免疫检查点。VISTA又称为PD-1H、C10orf54和Dies1，是Ⅰ型跨膜蛋白，主要表达于造血细胞、粒细胞和T细胞，其天然结合受体为VSIG8(V-Set and Immunoglobulin domain containing 8，VSIG8)/VSIG3(V-set and Ig domain-containingprotein 3，VSIG3)。VISTA具有受体和配体的双重功能，在肿瘤微环境和肿瘤浸润淋巴结中表达升高，可抑制T细胞对肿瘤抗原的应答，抑制T细胞分化为调节性T细胞(Treg)，降低白细胞介素2(IL-2)的产生，具有免疫抑制和免疫调节的功能，但是VISTA并不会对B细胞的增殖产生影响。

VISTA与转移性黑素瘤、诱导性黑素瘤和年龄相关的炎症表型的发生相关，并且具有不同于程序性死亡蛋白1及配体1(PD-1/PD-L1)信号通路。此外，VISTA在自身免疫性疾病和器官移植排异反应上也表现出显著的调节作用，如小鼠系统性红斑狼疮模型和急性移植物抗宿主疾病模型。在小鼠鳞状上皮细胞肿瘤模型上联用VISTA和细胞毒T淋巴细胞相关(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4)单克隆抗体可有效的将静歇期T细胞和被耗竭的T细胞转变分化为效应T细胞，临床研究证实，VISTA在人类胃癌、口腔鳞状细胞癌和非小细胞肺癌上表达显著升高，而在使用伊匹木治疗前列腺癌后VISTA的表达会明显上升。

因此，在蛋白层面筛选与VISTA蛋白有亲和力的短肽，并得到可与VISTA 蛋白结合的多肽氨基酸序列，开发特异性VISTA靶点抑制剂是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明通过构建ELISA法筛选模型，提供了与VISTA具有亲和力的短肽及其用途，为特异性VISTA靶点抑制剂的药物开发提供实验依据，为VISTA靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物的开发奠定基础。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

与VISTA具有亲和力的短肽，所述短肽的氨基酸序列如下：

进一步地，所述短肽与所述VISTA的结合率均大于15％。

包含所述短肽的多肽变体，其中所述多肽变体为对所述短肽进行一种或多种修饰；所述修饰包括与人免疫球蛋白Fc片段或其变体融合；与人血清白蛋白或其变体融合；与肿瘤穿透肽融合；与肿瘤靶向性单链或单域抗体融合；或与聚乙二醇、Xtenylation、PASylation或HESylation融合。

包含所述短肽的药物组合物，所述药物组合物还包括与所述短肽相适配的载体、治疗因子、赋形剂和稀释剂；其中药物组合物可以为本发明中各物质直接混合得到的溶剂化合物；也可以是将各物质溶解于水中，通过冻干得到的冻干粉；

其中，赋形剂为葡萄糖；稀释剂为氯化钠或碳酸氢钠；载体为有机物质。