[发明专利]多肽、其衍生物及其在制备防治肿瘤的药物中的应用

说明书

本发明公开了一种特异性结合β‑catenin的多肽，其为氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有TRIB3活性的TRIB3突变体。还公开了所述多肽的衍生物，其为所述多肽与穿膜肽连接形成的嵌合肽。本发明公开了含所述多肽或多肽衍生物为活性成分的抗肿瘤的药物组合物。还公开了所述多肽、多肽衍生物和药物组合物在制备预防和/或治疗与TRIB3及β‑catenin相关的疾病特别是肿瘤的药物中的应用。所述药物组合物具有与β‑catenin特异性结合，并能阻断TRIB3和β‑catenin蛋白结合的能力，同时可以降低TRIB3的蛋白水平。制备的药物具有疗效显著、毒副作用少、使用安全的优点。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及多肽、其衍生物及其在制备防治肿瘤的药物中的应用。

背景技术

Wnt/β-catenin信号通路于多种肿瘤(结肠癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、胶质瘤及乳腺癌)中都存在异常活化，在肿瘤发生、肿瘤增殖、肿瘤转移、肿瘤休眠、肿瘤免疫、肿瘤耐药及维持肿瘤干性等方面都发挥促进作用。β-catenin作为该信号通路的效应分子，通常会被其降解复合物成员Axin-2、APC及GSK-3β等磷酸化，进而进入泛素化途径降解。而当Wnt信号异常激活时，其降解复合物成员解体，细胞浆内堆积的β-catenin会转位进入细胞核内与LEF/TCF家族形成转录复合物，共同促进多种致癌因子的转录，从而促进肿瘤的发展进程。

目前，针对该通路的靶向抑制剂主要包括小分子药物、抗体类药物、RNA干扰药物及天然产物。在为期三十多年的研究中，除少数药物进入临床试验外，多数药物仍处于临床前研究当中，尚未见靶向药物上市。在研药物作用类型主要分为四种：抑制配基Wnt-3a与细胞膜表面受体LRP5/6及Frizzled的结合；降低β-catenin的蛋白表达水平；抑制β-catenin的细胞核转位；抑制细胞核内β-catenin/TCF转录复合物的活性。由于Wnt-3a与受体结合这一过程并不是导致β-catenin升高的唯一因素，如在多种结肠癌中β-catenin本身或者其降解复合物组分APC的突变是诱导该通路异常激活的关键步骤，所以第一类药物普适性不强。第二类药物主要为GSK-3β、Axin-2、PKA等β-catenin降解复合物成员的激动剂，同样由于β-catenin等上游信号蛋白的突变，使这种类型药物的应用也存在局限性；此外，由于β-catenin在生理状态下维持细胞膜及细胞骨架的正常结构，故下调β-catenin的蛋白水平可能存在较大风险。所以对β-catenin的调控重心应该放在抑制β-catenin入核或抑制其在细胞核内转录复合物的活性这两个方面。目前由于入核抑制剂的靶向专一性不强，使这类药物的开发难度大大增加。而一些打断β-catenin及转录辅因子TCF4相互作用的化合物或多肽药物直接作用于该信号通路的下游分子，靶向性强、副作用小，具有良好的抑制肿瘤发生和发展的成药前景。

TRIB3(Tribbles Homologue 3)是人体中假性激酶Tribbles同源蛋白家族成员之一，具有接头蛋白样的功能，参与多种蛋白复合体的组装。其最早在果蝇中被鉴定到，并发现该蛋白能抑制有丝分裂，调节发育过程中细胞的增殖、迁移及形态形成。TRIB3通过与多种蛋白相互作用，在糖脂代谢、脂肪细胞分化、凋亡、应激和胶原表达等生理、病理过程中发挥重要的调控作用。TRIB3在多种肿瘤细胞系和人肿瘤组织中呈现高表达。在我们前期的研究中发现TRIB3能与Smad3相互作用，增强TGF-β/Smad3信号通路活性，促进肿瘤侵袭。此外，我们还发现，肿瘤微环境中的高胰岛素(insulin)及胰岛素样生长因子1(IGF-1)可以上调TRB3的表达。TRIB3与自噬受体P62相互作用，抑制P62与LC3及泛素化底物结合，从而造成P62和泛素化蛋白堆积，并继发性抑制蛋白酶体功能。TRIB3对自噬及泛素蛋白酶体系统的抑制连接了糖尿病和肿瘤的恶性进程。