[发明专利]一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法在审
申请号: | 201810466723.9 | 申请日: | 2018-05-16 |
公开(公告)号: | CN108410914A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 刘振龙;张乐山;高金龙 | 申请(专利权)人: | 山东兰典生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12P7/46 | 分类号: | C12P7/46;C07C51/42;C07C51/43;C07C55/10;C12R1/19 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 杨筠 |
地址: | 262700 山东省潍坊市寿光*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 丁二酸钠 葡萄糖 丁二酸钠发酵液 发酵菌株 发酵 微生物发酵技术 重组大肠杆菌 二级种子罐 发酵培养基 一级种子罐 二级种子 好氧培养 生产过程 厌氧发酵 一级种子 运行过程 发酵罐 悬浊液 厌氧 生产成本 废弃物 配置 | ||
1.一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法,其特征在于:所述方法以重组大肠杆菌为发酵菌株,所述发酵菌株依序在一级种子罐中好氧培养,二级种子罐中好厌氧结合培养,发酵罐中厌氧发酵,制得丁二酸钠发酵液,对所述丁二酸钠发酵液进行提取制得丁二酸钠产品,其中,所述发酵罐中采用以葡萄糖为碳源配置发酵培养基,所述一级种子罐、所述二级种子罐与所述发酵罐在运行过程中流加入NaOH或/和Na2CO3悬浊液。
2.如权利要求1所述的一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法,其特征在于:所述一级种子罐和所述二级种子罐中采用的种子培养基组成成分按质量浓度计为:葡萄糖:20g/L、蛋白胨:10g/L、KH2PO4:1g/L、MgSO4·7H2O:0.5g/L,流加入质量浓度为20%的所述NaOH或/和Na2CO3悬浊液,维持体系PH值稳定在6.8~7.2,蒸馏水定容至所需体积。
3.如权利要求2所述的一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法,其特征在于:所述发酵培养基组成成分按质量浓度计为:葡萄糖:20g/L、玉米浆干粉:1.5g/dL、酵母浸出物:1.5g/L、MgSO4:0.8g/L、(NH4)2HPO4:3.5g/L、C5H11NO2·HCl:1.3g/L、KCl:0.6g/L、CuSO4:56mg/L、FeSO4·7H2O:42mg/L,流加入质量浓度为20%的所述NaOH或/和Na2CO3悬浊液,维持体系PH值稳定在6.5~7.0,蒸馏水定容至所需体积。
4.如权利要求3所述的一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法,其特征在于:所述一级种子罐的好氧培养条件为:温度控制30~35℃、风量控制0.85vvm、DO控制15~25%、转速300~350r/min、罐压0.05Mpa。
5.如权利要求4所述的一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法,其特征在于:所述发酵菌株在所述二级种子罐中的最后一个小时进行厌氧培养,其余时间进行好氧培养,所述二级种子罐的好氧培养条件为:温度控制30~35℃、风量控制1.1vvm、DO控制10~15%、转速:150~200r/min、罐压0.05Mpa;所述二级种子罐的厌氧培养条件为:温度控制30~35℃、CO2每分钟体积通入量为0.1%~0.5%的二级种子罐体积、转速:150~200r/min、罐压0.05Mpa。
6.如权利要求5所述的一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法,其特征在于:所述发酵罐厌氧发酵条件为:温度控制30~35℃、CO2每分钟体积通入量为0.1%~0.5%的发酵罐体积、转速为300~350r/min、罐压0.05Mp。
7.如权利要求6所述的一种以葡萄糖为原料生产丁二酸钠的方法,其特征在于:所述丁二酸钠发酵液的提取方法步骤如下:
(1)过滤:将制得的丁二酸钠发酵液由泵依次输送至陶瓷膜组件和超滤膜组件,过滤得清液;
(2)蒸发浓缩:将清液由泵输送至蒸发器中,将其浓缩至丁二酸钠含量为30%~45%,得浓缩液;
(3)结晶:将浓缩液转入结晶系统,控制温度降低至15~30℃,停留20~40min,得结晶液;
(4)离心分离:将结晶液转入离心机,离心得丁二酸钠晶体和结晶母液;
(5)干燥:将离心得到的丁二酸钠晶体转入至流化床,控制温度110~130℃,干燥制得丁二酸钠产品。
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