[发明专利]一种快速检测动物性食品中五元杂环的磺胺类药物残留的方法

说明书

本发明涉及一种快速检测动物性食品中五元杂环的磺胺类药物残留的方法，属于食品检测领域。为了克服现有技术的不足，本发明提供一种快速检测动物性食品中五元杂环的磺胺类药物残留的方法，本发明通过水热合成法制备得到上转换纳米粒子NaYF₄：Yb，Er，将其功能化修饰后与磺胺类抗体利用戊二醛方法进行偶联，得到磺胺类抗体‑NaYF₄：Yb，Er；通过柠檬酸钠合成法得到金纳米材料并偶联磺胺类抗原，然后构建上转换纳米粒子‑金纳米的能量共振转移体系，本发明能得到粒径较小，单分散性好，荧光信号强的上转换纳米粒子，可以通过纳米粒子的荧光变化量对五元杂环类的磺胺类药物进行定量，并确定五元杂环的磺胺类药物的检测范围。

技术领域

本发明涉及一种快速检测动物性食品中五元杂环的磺胺类药物残留的方法，属于食品检测领域。

背景技术

在食品安全检测中，经常利用荧光染料与研究对象进行结合形成化合物，然后通过化合物的荧光特性反映研究对象性能的信息。但是这些结合后的化合物在紫外波段下发生激发光时，有可能会使生物组织及其肽、蛋白质、核酸等产生强烈的背景荧光。某些荧光素还会产生生物学毒性，导致抗原或抗体的灵敏度和选择性下降，影响实际检测效果或严重危害到被检测的生物体。上转换发光技术就是利用功能化的上转换发光材料与生物分子结合形成良好的低毒性、抗光漂白、方便的标记物，对有害分子进行检测，从而解决传统化学荧光染料的局限。

食品安全检测中运用上转换发光技术，必须先对上转换发光材料进行氨基化、醛基化、羧基化的表面修饰，以增强上转换发光材料在水溶液中的分散性和稳定性，使其易于和生物大分子相结合，便于运用在食品安全检测中。利用戊二醛方法，标记磺胺类抗体，形成标记物。

上转换发光技术是把上转换发光材料NaYF₄：Yb，Er作为能量供体，把金纳米粒子作为能量受体，分别结合五元杂环的磺胺类抗体和抗原，由于供体的发射光谱与受体的吸收光谱重叠，抗原抗体也会发生免疫反应，因此可以缩短供体和受体分子之间的距离，从而实现能量淬灭。随后加入一定量的游离抗原，让游离的抗原和金纳米材料上的抗原形成免疫竞争，使得上转换发光材料和金纳米的荧光能量共振转移体系被破坏，荧光淬灭消失，荧光量增加，因此可以根据发光的变化对游离抗原进行量化。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种快速检测动物性食品中五元杂环的磺胺类药物残留的方法，本发明通过水热合成法制备得到上转换纳米粒子NaYF₄：Yb，Er，将其功能化修饰后与磺胺类抗体利用戊二醛方法偶联，得到磺胺类抗体-NaYF₄：Yb，Er；通过柠檬酸钠合成法得到金纳米材料并偶联磺胺类抗原，然后构建上转换纳米粒子-金纳米的能量共振转移体系，本发明能得到的纳米材料粒径较小，单分散性好，荧光信号强，可以通过上转换材料的荧光变化量来确定五元杂环的磺胺类药物的检测范围。

本发明通过下述技术方案实现上述技术效果：

一种快速检测动物性食品中五元杂环的磺胺类药物残留的方法，是通过水热合成法制备得到上转换纳米粒子NaYF₄：Yb，Er，将其功能化修饰后和磺胺类抗体利用戊二醛方法偶联，得到磺胺类抗体-NaYF₄：Yb，Er；通过柠檬酸钠合成法得到金纳米材料，偶联磺胺类抗原得到磺胺类抗原-BSA-金纳米溶液，然后构建上转换纳米粒子-金纳米的能量共振转移体系，通过测定荧光强度确定磺胺类抗原的浓度。

本发明所述的快速检测动物性食品中五元杂环的磺胺类药物残留的方法，具体包括下述步骤：

1)NaYF₄：Yb，Er纳米粒子的制备