[发明专利]一种用于检测胃癌的试剂盒

说明书

本发明涉及一种用于检测胃癌的试剂盒，其包括胃癌相关的基因突变引物：正向引物如SEQ ID NO.3所示；反向引物如SEQ ID NO.4所示。本发明获得了胃癌发病相关突变位点谱和特异性标志物；通过突变位点序列的改变进行相关诊断试剂盒的研制和应用，可使得胃癌的诊断更加方便易行，为临床医生快速准确掌握患者病情，为临床治疗效果评价奠定基础，并为发现具有潜在治疗价值的新型小分子药物靶标提供帮助。

技术领域

本发明属于生物检测领域，涉及一种用于检测胃癌的试剂盒。

背景技术

胃癌是最常见消化道恶性肿瘤肿瘤之一，是严重威胁人类健康生命的常见病、多发病。据统计，全世界每年约有90万人新诊断为胃癌，在我国，胃癌占消化道恶性肿瘤第1位，全身恶性肿瘤第3位。根据卫生部卫生信息统计中心2001年公布的资料，恶性肿瘤是我国城市居民的第1位死因，死亡率为135.59/10万04.9％)。其中，胃癌在恶性肿瘤死因中居第3位。胃癌的发生、发展同其他恶性肿瘤一样，属多因素、多步骤、多阶段和多基因改变过程。

我国是胃癌的高发区，每年我国新发现40万胃癌患者，约占世界胃癌发病人数的42％左右。由于胃癌早期症状不明显，又缺乏特异的早期诊断方法【di Mario F etal.Non-invasive tests in gastric diseases.Dig Liver Dis40:523-530(2008)】，现有的肿瘤标志物CEA、CA19-9、CA50、CA125在胃癌中的敏感度与特异性不高，对胃癌具较高特异性的CA72-4也通常在胃癌的III-IV期增高。胃癌的明确诊断通常在疾病的进展期才能做出，而此时病人的平均生存期只有7～9个月【Wagner AD et al.Chemotherapy inadvanced gastric cancer：a systematic review and meta-analysis based onaggregate data.J Clin 0ncol.24:2903-2909(2006)】。近年来，某些基因的单核苷酸多态性(SNP)在恶性肿瘤易感性研究中倍受关注，研究认为亚甲基四氢叶酸还原酶基因(Methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)的C677T位点(rsl801133),CYP2E1的rs2031920位点增加个体患胃癌的风险。

因而寻找利于早期诊断和早期治疗的生物标志物一直是胃癌研究的热点，如IncRNAs。但随着肿瘤分子生物学研究的深入，科学家逐渐将目光转向环状RNA(circularRNA，circRNA)，因其在致癌与肿瘤抑制途径中显露出的潜在作用而成为肿瘤研究的新热点，circRNA是区别于传统线性RNA的RNA家族新成员，不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴、并以共价键形成环形结构的非编码RNA分子。最新研究表明，circRNA具有闭合环状结构，主要通过非典型可变剪切加工产生，广泛存在于各种生物细胞中，具有结构稳定，难以被RNA酶降解、表达丰度高、物种间保守性好，表达具有组织及时空特异性等特征，这些特点使得circRNA在疾病诊断与治疗新型方法的开发应用上具有广阔的前景。

现有技术检测胃癌易感人群，采用杂交芯片法或玻璃板芯片法，以及利用taqman探针，该方法准确率低、假阴性和假阳性率较高，且不能批量检测；另一种直接测序法，虽准确率高，但其成本高、同样不能实现批量检测，因此现有方法均无法满足大规模基因筛选的要求。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有新的突变位点的ABCG2突变基因。

本发明另一个目的是提供检测上述突变位点的特异性引物。

本发明第三个目的是提供上述ABCG2突变基因及特异性引物在制备胃癌辅助诊断试剂盒中的应用。

本发明第四个目的是提供一种胃癌辅助诊断试剂盒。