[发明专利]恶臭假单胞菌MRP-2及其应用

说明书

本发明涉及环境保护领域，具体涉及恶臭假单胞菌MRP‑2及其应用。所述恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)MRP‑2保藏编号为CGMCC NO.15337。本发明筛选得到的菌株对难溶性磷具有一定的活化效果，并且可以在较高重金属压力环境下生存并发挥功能，具有易培养、成本低廉的特征。

技术领域

本发明涉及环境保护领域，具体涉及恶臭假单胞菌MRP-2及其应用。

背景技术

土壤重金属污染具有隐蔽性和持久性，目前越来越多的生物技术被应用于土壤重金属污染的修复，但往往存在修复植株生长缓慢的问题。解磷微生物能够依靠自身的代谢产物或通过与其他生物的协同作用，将土壤中的难溶性磷转化为可供植物吸收利用的磷，从而在一定程度上解决重金属污染土壤修复植物生长缓慢的问题。但现有解磷微生物对重金属的耐受性普遍较低，不能在较高浓度的重金属压力下生存并发挥作用，因此需要找到合适的具有重金属抗性的解磷微生物，使其可以在重金属污染土壤的植物-微生物联合修复过程中对植物根系进行保护，活化根际区域磷素，促进植株生长，进而增强重金属修复植物的生存竞争力和修复效率。

发明内容

本发明的目的在于提供具有解磷能力且有一定重金属抗性的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)MRP-2；

本发明从重金属污染土壤中筛选到无机解磷菌，确定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)，于2018年2月2日送交中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，其保藏编号为：CGMCC NO.15337。

本发明的再一目的是提供上述恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)在重金属环境下的应用，重金属包括：铅、铬。

本发明还提供了包含上述恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)MRP-2的土壤修复菌剂。

本发明筛选得到的菌株对难溶性磷具有一定的活化效果，并且可以在较高重金属压力环境下生存并发挥功能，具有易培养、成本低廉的特征。本发明筛选得到的菌株对环境友好，不会产生二次污染，可用于土壤重金属污染的植物-微生物联合修复工程。

附图说明

图1显示恶臭假单胞菌在平板培养基中的解磷圈；

图2显示恶臭假单胞菌在磷酸三钙培养基中48小时内对磷素的活化能力；

图3显示在铅、铬压力下，恶臭假单胞菌生长量的变化。

恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)MRP-2于2018年2月2日送交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)(地址，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，100101)，其保藏编号为：CGMCC NO.15337。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1具有重金属抗性解磷菌的筛选

以重金属污染土壤为细菌来源，将采集来的土壤样品放在-20℃保存。待实验时，将土壤样品解冻至常温，称取10g土壤至90mL无菌水中，在120rpm震荡30min后，制成土壤悬液。梯度稀释，对10^-5～10^-3稀释梯度用移液枪各取0.1mL菌液至磷酸三钙固体培养基中，涂布均匀，倒置于28℃恒温培养箱7d，观察平板中菌落生长情况与溶磷圈产生(如图1所示)，将产生解磷圈的菌种，采用平板涂布和分区划线法，经多次分离纯化，最终获得具有解磷能力的菌株，并将其接种在牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于4℃冰箱内保存备用。